动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2012年
2期
1-4
,共4页
李博%魏峰%刘全%马洪霞%许越%金洪涛%商立民
李博%魏峰%劉全%馬洪霞%許越%金洪濤%商立民
리박%위봉%류전%마홍하%허월%금홍도%상립민
蜥蜴利什曼原虫%弓形虫ROP18基因%重组蛋白
蜥蜴利什曼原蟲%弓形蟲ROP18基因%重組蛋白
석척리십만원충%궁형충ROP18기인%중조단백
用PCR方法从弓形虫RH株全基因组中扩增ROP18基因,将其克隆至pMD18-T载体,经测序分析后,构建真核表达穿梭质粒pLEXSY-neo2-ROP18；利用电转染技术将外源基因表达盒转入蜥蜴利什曼原虫,G418筛选阳性克隆；阳性克隆分离培养后提取基因组,用ROP18特异性引物及同源重组鉴定引物进行重组利什曼原虫PCR鉴定,结果阳性虫体中扩增出特异性目的条带；应用鼠抗弓形虫多抗血清以Western blot印记法从蛋白水平进行重组蛋白检测,证明目的蛋白在蜥蜴利什曼原虫中得到表达.
用PCR方法從弓形蟲RH株全基因組中擴增ROP18基因,將其剋隆至pMD18-T載體,經測序分析後,構建真覈錶達穿梭質粒pLEXSY-neo2-ROP18；利用電轉染技術將外源基因錶達盒轉入蜥蜴利什曼原蟲,G418篩選暘性剋隆；暘性剋隆分離培養後提取基因組,用ROP18特異性引物及同源重組鑒定引物進行重組利什曼原蟲PCR鑒定,結果暘性蟲體中擴增齣特異性目的條帶；應用鼠抗弓形蟲多抗血清以Western blot印記法從蛋白水平進行重組蛋白檢測,證明目的蛋白在蜥蜴利什曼原蟲中得到錶達.
용PCR방법종궁형충RH주전기인조중확증ROP18기인,장기극륭지pMD18-T재체,경측서분석후,구건진핵표체천사질립pLEXSY-neo2-ROP18；이용전전염기술장외원기인표체합전입석척리십만원충,G418사선양성극륭；양성극륭분리배양후제취기인조,용ROP18특이성인물급동원중조감정인물진행중조리십만원충PCR감정,결과양성충체중확증출특이성목적조대；응용서항궁형충다항혈청이Western blot인기법종단백수평진행중조단백검측,증명목적단백재석척리십만원충중득도표체.
