临床肿瘤学杂志
臨床腫瘤學雜誌
림상종류학잡지
CHINESE CLINICAL ONCOLOGY
2012年
5期
398-402
,共5页
冯婉婷%喻晓娟%李进%史玉叶%曹维克%邓之奎%何敬东
馮婉婷%喻曉娟%李進%史玉葉%曹維剋%鄧之奎%何敬東
풍완정%유효연%리진%사옥협%조유극%산지규%하경동
RNA干扰%慢病毒%染色体结构维持-1A基因%奥沙利铂
RNA榦擾%慢病毒%染色體結構維持-1A基因%奧沙利鉑
RNA간우%만병독%염색체결구유지-1A기인%오사리박
目的 探讨沉默结直肠癌细胞株染色体结构维持-1A(SMC1A)基因对奥沙利铂(L-OHP)敏感性的影响.方法 构建SMC1A基因的小分子RNA干扰表达质粒.与慢病毒包装质粒一起转染239T细胞制备pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体,并将重组质粒转染结直肠癌SW480、HT-29细胞株.RT-PCR、Western blotting法检测SMC1A mRNA和蛋白的表达情况.CCK-8法检测不同浓度L-OHP对细胞的抑制作用.结果 pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体构建成功,RT-PCR产物为343bp.RT-PCR显示重组质粒转染的SW480、HT-29细胞SMC1A mRNA表达量明显低于其对应的未转染细胞(0.13±0.02vs.1.02±0.06,0.182±0.019vs.1.114±0.032;P＜0.05)；Western blotting显示干扰后的细胞SMC1A蛋白表达受到明显抑制；不同浓度的L-OHP处理细胞48h后,CCK-8显示转染SMC1A-siRNA细胞生长抑制率较未转染细胞高,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 沉默结直肠癌细胞株SMC1A基因对奥沙利铂的敏感性显著增加,为临床进一步提高结直肠癌的疗效提供了研究基础.
目的 探討沉默結直腸癌細胞株染色體結構維持-1A(SMC1A)基因對奧沙利鉑(L-OHP)敏感性的影響.方法 構建SMC1A基因的小分子RNA榦擾錶達質粒.與慢病毒包裝質粒一起轉染239T細胞製備pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒載體,併將重組質粒轉染結直腸癌SW480、HT-29細胞株.RT-PCR、Western blotting法檢測SMC1A mRNA和蛋白的錶達情況.CCK-8法檢測不同濃度L-OHP對細胞的抑製作用.結果 pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒載體構建成功,RT-PCR產物為343bp.RT-PCR顯示重組質粒轉染的SW480、HT-29細胞SMC1A mRNA錶達量明顯低于其對應的未轉染細胞(0.13±0.02vs.1.02±0.06,0.182±0.019vs.1.114±0.032;P＜0.05)；Western blotting顯示榦擾後的細胞SMC1A蛋白錶達受到明顯抑製；不同濃度的L-OHP處理細胞48h後,CCK-8顯示轉染SMC1A-siRNA細胞生長抑製率較未轉染細胞高,差異具有統計學意義(P＜0.05).結論 沉默結直腸癌細胞株SMC1A基因對奧沙利鉑的敏感性顯著增加,為臨床進一步提高結直腸癌的療效提供瞭研究基礎.
목적 탐토침묵결직장암세포주염색체결구유지-1A(SMC1A)기인대오사리박(L-OHP)민감성적영향.방법 구건SMC1A기인적소분자RNA간우표체질립.여만병독포장질립일기전염239T세포제비pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA만병독재체,병장중조질립전염결직장암SW480、HT-29세포주.RT-PCR、Western blotting법검측SMC1A mRNA화단백적표체정황.CCK-8법검측불동농도L-OHP대세포적억제작용.결과 pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA만병독재체구건성공,RT-PCR산물위343bp.RT-PCR현시중조질립전염적SW480、HT-29세포SMC1A mRNA표체량명현저우기대응적미전염세포(0.13±0.02vs.1.02±0.06,0.182±0.019vs.1.114±0.032;P＜0.05)；Western blotting현시간우후적세포SMC1A단백표체수도명현억제；불동농도적L-OHP처리세포48h후,CCK-8현시전염SMC1A-siRNA세포생장억제솔교미전염세포고,차이구유통계학의의(P＜0.05).결론 침묵결직장암세포주SMC1A기인대오사리박적민감성현저증가,위림상진일보제고결직장암적료효제공료연구기출.
