中国微循环
中國微循環
중국미순배
JOURNAL OF CHINESE MICROCIRCULATION
2007年
4期
240-243
,共4页
厉泉%张凯伦%龚永生%徐鹏%郭超%祖育昆
厲泉%張凱倫%龔永生%徐鵬%郭超%祖育昆
려천%장개륜%공영생%서붕%곽초%조육곤
冠状动脉旁路移植术%经皮冠状动脉内成形术%组织因子途径抑制因子%基因%载体%转染
冠狀動脈徬路移植術%經皮冠狀動脈內成形術%組織因子途徑抑製因子%基因%載體%轉染
관상동맥방로이식술%경피관상동맥내성형술%조직인자도경억제인자%기인%재체%전염
目的 构建真核表达载体pCMV-(Kozak)TFPI并检测其在内皮细胞中的表达,为冠状动脉旁路移植和经皮冠状动脉内成形术中转染血管内皮细胞抗凝治疗作了实验和理论的探索.方法 用RT-PCR的方法提取人组织因子途径抑制因子(TFPI)基因,并引入Kozak序列,将(Kozak)TFPI亚克隆入pCMV质粒中.在阳离子脂质体介导下,转染人脐静脉内皮细胞(HUVEC).RT-PCR、免疫荧光和Western blot检测HUVEC中外源TFPI基因mRNA和蛋白的表达.结果 (Kozak)TFPI成功克隆入pCMV中.RT-PCR、免疫荧光和Western blot检测到外源TFPI基因mRNA和蛋白的表达.结论 成功构建了pCMV-(Kozak)TFPI真核表达载体,并表达出相应的蛋白.
目的 構建真覈錶達載體pCMV-(Kozak)TFPI併檢測其在內皮細胞中的錶達,為冠狀動脈徬路移植和經皮冠狀動脈內成形術中轉染血管內皮細胞抗凝治療作瞭實驗和理論的探索.方法 用RT-PCR的方法提取人組織因子途徑抑製因子(TFPI)基因,併引入Kozak序列,將(Kozak)TFPI亞剋隆入pCMV質粒中.在暘離子脂質體介導下,轉染人臍靜脈內皮細胞(HUVEC).RT-PCR、免疫熒光和Western blot檢測HUVEC中外源TFPI基因mRNA和蛋白的錶達.結果 (Kozak)TFPI成功剋隆入pCMV中.RT-PCR、免疫熒光和Western blot檢測到外源TFPI基因mRNA和蛋白的錶達.結論 成功構建瞭pCMV-(Kozak)TFPI真覈錶達載體,併錶達齣相應的蛋白.
목적 구건진핵표체재체pCMV-(Kozak)TFPI병검측기재내피세포중적표체,위관상동맥방로이식화경피관상동맥내성형술중전염혈관내피세포항응치료작료실험화이론적탐색.방법 용RT-PCR적방법제취인조직인자도경억제인자(TFPI)기인,병인입Kozak서렬,장(Kozak)TFPI아극륭입pCMV질립중.재양리자지질체개도하,전염인제정맥내피세포(HUVEC).RT-PCR、면역형광화Western blot검측HUVEC중외원TFPI기인mRNA화단백적표체.결과 (Kozak)TFPI성공극륭입pCMV중.RT-PCR、면역형광화Western blot검측도외원TFPI기인mRNA화단백적표체.결론 성공구건료pCMV-(Kozak)TFPI진핵표체재체,병표체출상응적단백.
