细胞生物学杂志
細胞生物學雜誌
세포생물학잡지
CHINESE JOURNAL OF CELL BIOLOGY
2008年
3期
387-391
,共5页
李听松%蒋莉%陈恒胜%张晓萍
李聽鬆%蔣莉%陳恆勝%張曉萍
리은송%장리%진항성%장효평
神经干细胞%海马%脑源性神经营养因子%增殖%分化
神經榦細胞%海馬%腦源性神經營養因子%增殖%分化
신경간세포%해마%뇌원성신경영양인자%증식%분화
探讨脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)对海马神经干细胞(neural progenitor/stem cells, NPCs)的存活、增殖及分化的影响.采用无血清培养基体外分离、纯化、扩增胎鼠海马NPCs.通过细胞形态观察、nestin免疫荧光染色及血清促分化检测NPCs的干细胞特性; 采用神经球计数及神经球直径测定观察BDNF对NPCs的促增殖作用, 筛选出在适当细胞密度下, 促进NPCs增殖的有效浓度; 采用Tunel染色及全自动生化分析仪测定细胞培养上清液乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)的含量探讨BDNF对海马NPCs存活的影响; 采用抗-b-微管蛋白(tubulin) III (Tuj-1)染色检测NPCs分化成神经元的百分率, 同时测定分化神经元突起的长度.分离的海马NPCs表现为nestin 免疫染色阳性, 具有自我增殖能力、且能分化为神经元和星形胶质细胞; 当细胞密度为5×105个/ ml 时, 10～200 ng/ml BDNF能显著促进NPCs的增殖, 其中40 ng/ml BDNF促增殖作用最强, 40 ng/ml BDNF能显著增大神经球直径; 40 ng/ml BDNF 显著减少NPCs的凋亡率(Tunel+/DAPI+ ), 抑制LDH漏出; 40 ng/ml BDNF能显著促进NPCs分化为Tuj-1免疫染色阳性神经元, 且分化后神经元的突起长度显著大于对照组.上述结果提示: BDNF促进海马NPCs的存活、增殖及向神经元方向分化.
探討腦源性神經營養因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF)對海馬神經榦細胞(neural progenitor/stem cells, NPCs)的存活、增殖及分化的影響.採用無血清培養基體外分離、純化、擴增胎鼠海馬NPCs.通過細胞形態觀察、nestin免疫熒光染色及血清促分化檢測NPCs的榦細胞特性; 採用神經毬計數及神經毬直徑測定觀察BDNF對NPCs的促增殖作用, 篩選齣在適噹細胞密度下, 促進NPCs增殖的有效濃度; 採用Tunel染色及全自動生化分析儀測定細胞培養上清液乳痠脫氫酶(lactic dehydrogenase, LDH)的含量探討BDNF對海馬NPCs存活的影響; 採用抗-b-微管蛋白(tubulin) III (Tuj-1)染色檢測NPCs分化成神經元的百分率, 同時測定分化神經元突起的長度.分離的海馬NPCs錶現為nestin 免疫染色暘性, 具有自我增殖能力、且能分化為神經元和星形膠質細胞; 噹細胞密度為5×105箇/ ml 時, 10～200 ng/ml BDNF能顯著促進NPCs的增殖, 其中40 ng/ml BDNF促增殖作用最彊, 40 ng/ml BDNF能顯著增大神經毬直徑; 40 ng/ml BDNF 顯著減少NPCs的凋亡率(Tunel+/DAPI+ ), 抑製LDH漏齣; 40 ng/ml BDNF能顯著促進NPCs分化為Tuj-1免疫染色暘性神經元, 且分化後神經元的突起長度顯著大于對照組.上述結果提示: BDNF促進海馬NPCs的存活、增殖及嚮神經元方嚮分化.
탐토뇌원성신경영양인자(brain derived neurotrophic factor, BDNF)대해마신경간세포(neural progenitor/stem cells, NPCs)적존활、증식급분화적영향.채용무혈청배양기체외분리、순화、확증태서해마NPCs.통과세포형태관찰、nestin면역형광염색급혈청촉분화검측NPCs적간세포특성; 채용신경구계수급신경구직경측정관찰BDNF대NPCs적촉증식작용, 사선출재괄당세포밀도하, 촉진NPCs증식적유효농도; 채용Tunel염색급전자동생화분석의측정세포배양상청액유산탈경매(lactic dehydrogenase, LDH)적함량탐토BDNF대해마NPCs존활적영향; 채용항-b-미관단백(tubulin) III (Tuj-1)염색검측NPCs분화성신경원적백분솔, 동시측정분화신경원돌기적장도.분리적해마NPCs표현위nestin 면역염색양성, 구유자아증식능력、차능분화위신경원화성형효질세포; 당세포밀도위5×105개/ ml 시, 10～200 ng/ml BDNF능현저촉진NPCs적증식, 기중40 ng/ml BDNF촉증식작용최강, 40 ng/ml BDNF능현저증대신경구직경; 40 ng/ml BDNF 현저감소NPCs적조망솔(Tunel+/DAPI+ ), 억제LDH루출; 40 ng/ml BDNF능현저촉진NPCs분화위Tuj-1면역염색양성신경원, 차분화후신경원적돌기장도현저대우대조조.상술결과제시: BDNF촉진해마NPCs적존활、증식급향신경원방향분화.
