中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
43期
8481-8484
,共4页
肝细胞生长因子%骨髓间充质干细胞%肝细胞
肝細胞生長因子%骨髓間充質榦細胞%肝細胞
간세포생장인자%골수간충질간세포%간세포
背景:提供肝细胞牛长因子的微环境可体外诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞.目的:实验拟验证并简化成年大鼠骨髓间充质干细胞体外向肝细胞的诱导分化.设计、时间及地点:观察实验,于2006-10/2008-05在北华大学完成.材料:实验动物为成年SD大鼠,雌雄不限,体质量180～230 g.方法:采用Percoll 梯度离心方法获取骨髓间充质十细胞,调整细胞密度为1×10嚣L-1,加入含有20 μ g/L肝细胞生长因子培养液培养,定期更换培养液.主要观察指标:流式细胞仪检测细胞表面标志和碱性磷酸酶染色鉴定细胞类型.倒置显微镜连续观察细胞分化过程的形态学变化.培养的1,3,7,14,21,28 d以细胞免疫组织化学检测细胞甲胎蛋白、细胞角蛋白18和清蛋白的表达.结果:接种后,细胞体积增大,形态多样贴壁细胞分化为体积较大的多角形和部分梭形,胞浆丰富,可见多核,接种早期细胞生长比接种晚期生长较快.分离纯化的SD大鼠骨髓间充质十细胞的表面标志为CD29+ ,CD44+ ,CD34",CD45和CD90+,细胞的碱性磷酸酶染色阴性,细胞纯度达98%以上.骨髓间充质干细胞的甲胎蛋白细胞免疫组织化学染色培养第7天即出现阳性,第14天清蛋白和细胞角蛋白18免疫组织化学染色阳性.结论:成年大鼠骨髓间充质干细胞在20 μ g/L肝细胞生长因子的诱导下,可分化为肝细胞.
揹景:提供肝細胞牛長因子的微環境可體外誘導骨髓間充質榦細胞分化為肝細胞.目的:實驗擬驗證併簡化成年大鼠骨髓間充質榦細胞體外嚮肝細胞的誘導分化.設計、時間及地點:觀察實驗,于2006-10/2008-05在北華大學完成.材料:實驗動物為成年SD大鼠,雌雄不限,體質量180～230 g.方法:採用Percoll 梯度離心方法穫取骨髓間充質十細胞,調整細胞密度為1×10囂L-1,加入含有20 μ g/L肝細胞生長因子培養液培養,定期更換培養液.主要觀察指標:流式細胞儀檢測細胞錶麵標誌和堿性燐痠酶染色鑒定細胞類型.倒置顯微鏡連續觀察細胞分化過程的形態學變化.培養的1,3,7,14,21,28 d以細胞免疫組織化學檢測細胞甲胎蛋白、細胞角蛋白18和清蛋白的錶達.結果:接種後,細胞體積增大,形態多樣貼壁細胞分化為體積較大的多角形和部分梭形,胞漿豐富,可見多覈,接種早期細胞生長比接種晚期生長較快.分離純化的SD大鼠骨髓間充質十細胞的錶麵標誌為CD29+ ,CD44+ ,CD34",CD45和CD90+,細胞的堿性燐痠酶染色陰性,細胞純度達98%以上.骨髓間充質榦細胞的甲胎蛋白細胞免疫組織化學染色培養第7天即齣現暘性,第14天清蛋白和細胞角蛋白18免疫組織化學染色暘性.結論:成年大鼠骨髓間充質榦細胞在20 μ g/L肝細胞生長因子的誘導下,可分化為肝細胞.
배경:제공간세포우장인자적미배경가체외유도골수간충질간세포분화위간세포.목적:실험의험증병간화성년대서골수간충질간세포체외향간세포적유도분화.설계、시간급지점:관찰실험,우2006-10/2008-05재북화대학완성.재료:실험동물위성년SD대서,자웅불한,체질량180～230 g.방법:채용Percoll 제도리심방법획취골수간충질십세포,조정세포밀도위1×10효L-1,가입함유20 μ g/L간세포생장인자배양액배양,정기경환배양액.주요관찰지표:류식세포의검측세포표면표지화감성린산매염색감정세포류형.도치현미경련속관찰세포분화과정적형태학변화.배양적1,3,7,14,21,28 d이세포면역조직화학검측세포갑태단백、세포각단백18화청단백적표체.결과:접충후,세포체적증대,형태다양첩벽세포분화위체적교대적다각형화부분사형,포장봉부,가견다핵,접충조기세포생장비접충만기생장교쾌.분리순화적SD대서골수간충질십세포적표면표지위CD29+ ,CD44+ ,CD34",CD45화CD90+,세포적감성린산매염색음성,세포순도체98%이상.골수간충질간세포적갑태단백세포면역조직화학염색배양제7천즉출현양성,제14천청단백화세포각단백18면역조직화학염색양성.결론:성년대서골수간충질간세포재20 μ g/L간세포생장인자적유도하,가분화위간세포.
