首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2009年
2期
195-198
,共4页
马立权%曾翔俊%王红霞%油红捷%芦玲巧%张立克%郑少鹏
馬立權%曾翔俊%王紅霞%油紅捷%蘆玲巧%張立剋%鄭少鵬
마립권%증상준%왕홍하%유홍첩%호령교%장립극%정소붕
CYP2J3%载体构建%心肌细胞%转染
CYP2J3%載體構建%心肌細胞%轉染
CYP2J3%재체구건%심기세포%전염
目的 克隆大鼠CYP2J3基因,与pcDNA 3.1(+)真核表达质粒载体连接,转染大鼠心肌细胞检测其表达.方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链式反应(OE-PCR)的方法扩增大鼠CYP2J3基因,与双酶切的pcDNA 3.1(+)连接,构建pcDNA 3.1(+)-CYP2J3真核表达载体.转染大鼠心肌细胞,用RT-PCR的方法鉴定其在大鼠心肌细胞的表达.结果得到CYP2J3基因全长序列和真核表达载体pcDNA 3.1(+)-CYP2J3.RT-PCR结果显示,转染pcDNA 3.1(+)-CYP2J3后的大鼠心肌细胞CYP2J3基因有稳定表达.结论克隆大鼠CYP2J3基因、pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体构建及在大鼠心肌细胞的表达均获成功,为进一步研究CYP2J3基因在细胞中的功能奠定了基础.
目的 剋隆大鼠CYP2J3基因,與pcDNA 3.1(+)真覈錶達質粒載體連接,轉染大鼠心肌細胞檢測其錶達.方法提取大鼠肝髒組織總RNA,採用逆轉錄聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)和重疊延伸聚閤酶鏈式反應(OE-PCR)的方法擴增大鼠CYP2J3基因,與雙酶切的pcDNA 3.1(+)連接,構建pcDNA 3.1(+)-CYP2J3真覈錶達載體.轉染大鼠心肌細胞,用RT-PCR的方法鑒定其在大鼠心肌細胞的錶達.結果得到CYP2J3基因全長序列和真覈錶達載體pcDNA 3.1(+)-CYP2J3.RT-PCR結果顯示,轉染pcDNA 3.1(+)-CYP2J3後的大鼠心肌細胞CYP2J3基因有穩定錶達.結論剋隆大鼠CYP2J3基因、pcDNA3.1(+)-CYP2J3真覈錶達載體構建及在大鼠心肌細胞的錶達均穫成功,為進一步研究CYP2J3基因在細胞中的功能奠定瞭基礎.
목적 극륭대서CYP2J3기인,여pcDNA 3.1(+)진핵표체질립재체련접,전염대서심기세포검측기표체.방법제취대서간장조직총RNA,채용역전록취합매련식반응(RT-PCR)화중첩연신취합매련식반응(OE-PCR)적방법확증대서CYP2J3기인,여쌍매절적pcDNA 3.1(+)련접,구건pcDNA 3.1(+)-CYP2J3진핵표체재체.전염대서심기세포,용RT-PCR적방법감정기재대서심기세포적표체.결과득도CYP2J3기인전장서렬화진핵표체재체pcDNA 3.1(+)-CYP2J3.RT-PCR결과현시,전염pcDNA 3.1(+)-CYP2J3후적대서심기세포CYP2J3기인유은정표체.결론극륭대서CYP2J3기인、pcDNA3.1(+)-CYP2J3진핵표체재체구건급재대서심기세포적표체균획성공,위진일보연구CYP2J3기인재세포중적공능전정료기출.
