医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2010年
5期
406-409
,共4页
熊建军%干丽君%龚帧%林玲%李卫东
熊建軍%榦麗君%龔幀%林玲%李衛東
웅건군%간려군%공정%림령%리위동
泛素水解酶22基因%融合蛋白%基因的表达与调控
汎素水解酶22基因%融閤蛋白%基因的錶達與調控
범소수해매22기인%융합단백%기인적표체여조공
目的 克隆人类泛素水解酶22(ubiquitin-specific processing enzyme 22,USP22)基因,构建与绿色荧光蛋白融合表达的真核载体.方法 利用RT-PCR技术以HeLa细胞总RNA为模板分别扩增USP22基因cDNA序列两片段,依次插入真核表达载体pEGFP-N1;重组质粒转染HEK293T细胞,观察融合蛋白表达及绿色荧光的分布.结果 测序结果显示USP22序列与GenBank收录数据一致,酶切显示重组质粒pEGFP-USP22构建无误,质粒转染后有80 %左右HEK293T细胞表达绿色荧光,且在胞质与胞核中广泛分布.结论 成功克隆USP22基因并构建与GFP融合表达的真核载体,为进一步深入研究USP22基因的生物学功能奠定了基础.
目的 剋隆人類汎素水解酶22(ubiquitin-specific processing enzyme 22,USP22)基因,構建與綠色熒光蛋白融閤錶達的真覈載體.方法 利用RT-PCR技術以HeLa細胞總RNA為模闆分彆擴增USP22基因cDNA序列兩片段,依次插入真覈錶達載體pEGFP-N1;重組質粒轉染HEK293T細胞,觀察融閤蛋白錶達及綠色熒光的分佈.結果 測序結果顯示USP22序列與GenBank收錄數據一緻,酶切顯示重組質粒pEGFP-USP22構建無誤,質粒轉染後有80 %左右HEK293T細胞錶達綠色熒光,且在胞質與胞覈中廣汎分佈.結論 成功剋隆USP22基因併構建與GFP融閤錶達的真覈載體,為進一步深入研究USP22基因的生物學功能奠定瞭基礎.
목적 극륭인류범소수해매22(ubiquitin-specific processing enzyme 22,USP22)기인,구건여록색형광단백융합표체적진핵재체.방법 이용RT-PCR기술이HeLa세포총RNA위모판분별확증USP22기인cDNA서렬량편단,의차삽입진핵표체재체pEGFP-N1;중조질립전염HEK293T세포,관찰융합단백표체급록색형광적분포.결과 측서결과현시USP22서렬여GenBank수록수거일치,매절현시중조질립pEGFP-USP22구건무오,질립전염후유80 %좌우HEK293T세포표체록색형광,차재포질여포핵중엄범분포.결론 성공극륭USP22기인병구건여GFP융합표체적진핵재체,위진일보심입연구USP22기인적생물학공능전정료기출.
