解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2011年
3期
268-270,275
,共4页
刘芙蓉%刘彤%王春玉%李家滨%李丰
劉芙蓉%劉彤%王春玉%李傢濱%李豐
류부용%류동%왕춘옥%리가빈%리봉
Microchidia2%转染%蛋白表达%胃癌
Microchidia2%轉染%蛋白錶達%胃癌
Microchidia2%전염%단백표체%위암
目的 构建真核表达载体pcDNA3.1-MORC2并瞬时转染人胃癌细胞SGC-7901,观察融合蛋白在细胞内表达及定位.方法 以人MORC2 cDNA为模板,PCR扩增MORC2全长编码基因,亚克隆至pcDNA3.1-hisA表达载体.将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞SGC-7901中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.用共聚焦激光扫描显微镜观察pcDNA3.1-MORC2在SGC-7901细胞内定位.结果 MORC2全长基因序列克隆到了表达载体pcDNA3.1-hisA中,酶切鉴定片段为3000bp.Western blot检测到了融合蛋白pcDNA3.1-MORC2在胃癌细胞系SGC-7901中表达,分子量约为122kDa,主要定位于细胞核.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-MORC2,并检测到融合蛋白表达主要定位于胃癌细胞核内.
目的 構建真覈錶達載體pcDNA3.1-MORC2併瞬時轉染人胃癌細胞SGC-7901,觀察融閤蛋白在細胞內錶達及定位.方法 以人MORC2 cDNA為模闆,PCR擴增MORC2全長編碼基因,亞剋隆至pcDNA3.1-hisA錶達載體.將構建的重組質粒測序併轉染到胃癌細胞SGC-7901中,提取細胞蛋白進行Western blot檢測.用共聚焦激光掃描顯微鏡觀察pcDNA3.1-MORC2在SGC-7901細胞內定位.結果 MORC2全長基因序列剋隆到瞭錶達載體pcDNA3.1-hisA中,酶切鑒定片段為3000bp.Western blot檢測到瞭融閤蛋白pcDNA3.1-MORC2在胃癌細胞繫SGC-7901中錶達,分子量約為122kDa,主要定位于細胞覈.結論 成功構建瞭真覈錶達載體pcDNA3.1-MORC2,併檢測到融閤蛋白錶達主要定位于胃癌細胞覈內.
목적 구건진핵표체재체pcDNA3.1-MORC2병순시전염인위암세포SGC-7901,관찰융합단백재세포내표체급정위.방법 이인MORC2 cDNA위모판,PCR확증MORC2전장편마기인,아극륭지pcDNA3.1-hisA표체재체.장구건적중조질립측서병전염도위암세포SGC-7901중,제취세포단백진행Western blot검측.용공취초격광소묘현미경관찰pcDNA3.1-MORC2재SGC-7901세포내정위.결과 MORC2전장기인서렬극륭도료표체재체pcDNA3.1-hisA중,매절감정편단위3000bp.Western blot검측도료융합단백pcDNA3.1-MORC2재위암세포계SGC-7901중표체,분자량약위122kDa,주요정위우세포핵.결론 성공구건료진핵표체재체pcDNA3.1-MORC2,병검측도융합단백표체주요정위우위암세포핵내.