中南医学科学杂志
中南醫學科學雜誌
중남의학과학잡지
JOURNAL OF UNIVERSITY OF SOUTH CHINA(MEDICAL EDITION)
2011年
4期
385-389,415
,共6页
李君君%周园芳%刘小军%颜家运
李君君%週園芳%劉小軍%顏傢運
리군군%주완방%류소군%안가운
亚砷酸%白血病%细胞系%K562/A02%多药耐药
亞砷痠%白血病%細胞繫%K562/A02%多藥耐藥
아신산%백혈병%세포계%K562/A02%다약내약
目的 研究亚砷酸对白血病多药耐药细胞株K562/A02细胞的作用及对多药耐药基因1(mdr1)、P糖蛋白(P-gp)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨亚砷酸逆转白血病多药耐药(MDR)的作用机制.方法 将K562/A02细胞与不同浓度的亚砷酸(0、0.5、2.0、5.0μmol/L)共同孵育,分别在24、48、72 h时,用Wright's染色法观察K562/A02细胞形态,流式细胞术(FCM)检测凋亡细胞,MTT法检测细胞增殖活性,RT-PCR法检测mdrl mRNA的表达,免疫组织化学法观察P-gp表达,并用ELISA法检测YEGF的浓度.结果 随着亚砷酸作用浓度和时间的增加,K562/A02细胞的数目减少,并出现凋亡形态学改变,FCM显示随着作用浓度和时间的增加,细胞凋亡率逐渐上升;从作用48h组开始,mdrl mRNA及P-gp的表达出现显著降低(P<0.05),mdrl mRNA条带颜色较空白对照组明显变浅,mdrl/GAPDH灰度比值下降,此时,P-gp的灰度值上升,且随亚砷酸作用浓度和时间的增加,mdtl mRNA条带颜色进一步变浅,表达水平进一步下降;ELISA法检测表明从0.5 μmol/L作用24h组开始,VEGF浓度即下降至405.02pg/mL(P<0.05),相同作用时间下以5.0 μmol/L组较其它浓度组下调VEGF的作用最为显著.结论 亚砷酸呈药物浓度—时间依赖性抑制K562/A02细胞增殖,诱导其凋亡,下调VEGF表达,有效抑制了mdrlmRNA的产生和P-gp的合成.
目的 研究亞砷痠對白血病多藥耐藥細胞株K562/A02細胞的作用及對多藥耐藥基因1(mdr1)、P糖蛋白(P-gp)和血管內皮生長因子(VEGF)錶達的影響,探討亞砷痠逆轉白血病多藥耐藥(MDR)的作用機製.方法 將K562/A02細胞與不同濃度的亞砷痠(0、0.5、2.0、5.0μmol/L)共同孵育,分彆在24、48、72 h時,用Wright's染色法觀察K562/A02細胞形態,流式細胞術(FCM)檢測凋亡細胞,MTT法檢測細胞增殖活性,RT-PCR法檢測mdrl mRNA的錶達,免疫組織化學法觀察P-gp錶達,併用ELISA法檢測YEGF的濃度.結果 隨著亞砷痠作用濃度和時間的增加,K562/A02細胞的數目減少,併齣現凋亡形態學改變,FCM顯示隨著作用濃度和時間的增加,細胞凋亡率逐漸上升;從作用48h組開始,mdrl mRNA及P-gp的錶達齣現顯著降低(P<0.05),mdrl mRNA條帶顏色較空白對照組明顯變淺,mdrl/GAPDH灰度比值下降,此時,P-gp的灰度值上升,且隨亞砷痠作用濃度和時間的增加,mdtl mRNA條帶顏色進一步變淺,錶達水平進一步下降;ELISA法檢測錶明從0.5 μmol/L作用24h組開始,VEGF濃度即下降至405.02pg/mL(P<0.05),相同作用時間下以5.0 μmol/L組較其它濃度組下調VEGF的作用最為顯著.結論 亞砷痠呈藥物濃度—時間依賴性抑製K562/A02細胞增殖,誘導其凋亡,下調VEGF錶達,有效抑製瞭mdrlmRNA的產生和P-gp的閤成.
목적 연구아신산대백혈병다약내약세포주K562/A02세포적작용급대다약내약기인1(mdr1)、P당단백(P-gp)화혈관내피생장인자(VEGF)표체적영향,탐토아신산역전백혈병다약내약(MDR)적작용궤제.방법 장K562/A02세포여불동농도적아신산(0、0.5、2.0、5.0μmol/L)공동부육,분별재24、48、72 h시,용Wright's염색법관찰K562/A02세포형태,류식세포술(FCM)검측조망세포,MTT법검측세포증식활성,RT-PCR법검측mdrl mRNA적표체,면역조직화학법관찰P-gp표체,병용ELISA법검측YEGF적농도.결과 수착아신산작용농도화시간적증가,K562/A02세포적수목감소,병출현조망형태학개변,FCM현시수착작용농도화시간적증가,세포조망솔축점상승;종작용48h조개시,mdrl mRNA급P-gp적표체출현현저강저(P<0.05),mdrl mRNA조대안색교공백대조조명현변천,mdrl/GAPDH회도비치하강,차시,P-gp적회도치상승,차수아신산작용농도화시간적증가,mdtl mRNA조대안색진일보변천,표체수평진일보하강;ELISA법검측표명종0.5 μmol/L작용24h조개시,VEGF농도즉하강지405.02pg/mL(P<0.05),상동작용시간하이5.0 μmol/L조교기타농도조하조VEGF적작용최위현저.결론 아신산정약물농도—시간의뢰성억제K562/A02세포증식,유도기조망,하조VEGF표체,유효억제료mdrlmRNA적산생화P-gp적합성.