中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
7期
58-61
,共4页
任泽民%姜勇%巴晓亮%胡长敏%陈颖钰%彭清洁%陈焕春%郭爱珍
任澤民%薑勇%巴曉亮%鬍長敏%陳穎鈺%彭清潔%陳煥春%郭愛珍
임택민%강용%파효량%호장민%진영옥%팽청길%진환춘%곽애진
牛支原体%单克隆抗体%免疫印迹%ELISA%杂交瘤%特异性
牛支原體%單剋隆抗體%免疫印跡%ELISA%雜交瘤%特異性
우지원체%단극륭항체%면역인적%ELISA%잡교류%특이성
以牛支原体(Mycoplasma bovis)湖北分离株HB0801作为抗原免疫8周龄BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术筛选出了6株能稳定分泌抗牛支原体的单克隆抗体细胞株,分别生产腹水并对单抗进行了纯化和特性鉴定.经亚型测定,这些单抗都属IgG类.腹水ELISA效价在1×105～1.6×10 6.ELISA特异性分析结果表明,6株单抗与临床分离的牛支原体菌株以及ATCC标准株PG45都显阳性反应,但与牛的其他常见病原菌如多杀性巴氏杆菌、化脓隐秘杆菌等都显阴性反应.所有制备的单抗都与无乳支原体有交叉反应,其中两株单抗1A5和1C11只与无乳支原体有交叉反应,与其他支原体无交叉反应.经Western blotting验证,6株单抗分别识别牛支原体全菌蛋白中的不同条带,说明分别针对不同的蛋白抗原.这些牛支原体单克隆抗体为后期建立牛支原体检测方法及致病机理研究奠定了良好基础.
以牛支原體(Mycoplasma bovis)湖北分離株HB0801作為抗原免疫8週齡BALB/c小鼠,利用雜交瘤技術篩選齣瞭6株能穩定分泌抗牛支原體的單剋隆抗體細胞株,分彆生產腹水併對單抗進行瞭純化和特性鑒定.經亞型測定,這些單抗都屬IgG類.腹水ELISA效價在1×105～1.6×10 6.ELISA特異性分析結果錶明,6株單抗與臨床分離的牛支原體菌株以及ATCC標準株PG45都顯暘性反應,但與牛的其他常見病原菌如多殺性巴氏桿菌、化膿隱祕桿菌等都顯陰性反應.所有製備的單抗都與無乳支原體有交扠反應,其中兩株單抗1A5和1C11隻與無乳支原體有交扠反應,與其他支原體無交扠反應.經Western blotting驗證,6株單抗分彆識彆牛支原體全菌蛋白中的不同條帶,說明分彆針對不同的蛋白抗原.這些牛支原體單剋隆抗體為後期建立牛支原體檢測方法及緻病機理研究奠定瞭良好基礎.
이우지원체(Mycoplasma bovis)호북분리주HB0801작위항원면역8주령BALB/c소서,이용잡교류기술사선출료6주능은정분비항우지원체적단극륭항체세포주,분별생산복수병대단항진행료순화화특성감정.경아형측정,저사단항도속IgG류.복수ELISA효개재1×105～1.6×10 6.ELISA특이성분석결과표명,6주단항여림상분리적우지원체균주이급ATCC표준주PG45도현양성반응,단여우적기타상견병원균여다살성파씨간균、화농은비간균등도현음성반응.소유제비적단항도여무유지원체유교차반응,기중량주단항1A5화1C11지여무유지원체유교차반응,여기타지원체무교차반응.경Western blotting험증,6주단항분별식별우지원체전균단백중적불동조대,설명분별침대불동적단백항원.저사우지원체단극륭항체위후기건립우지원체검측방법급치병궤리연구전정료량호기출.
