眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2010年
6期
507-512
,共6页
脉络膜-视网膜内皮细胞%枸杞多糖%葡萄糖%通透性%Rho激酶1
脈絡膜-視網膜內皮細胞%枸杞多糖%葡萄糖%通透性%Rho激酶1
맥락막-시망막내피세포%구기다당%포도당%통투성%Rho격매1
目的 探讨高糖条件下猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6As)损伤时的单层通透性、Rho激酶1(ROCK1)的变化及它们之间的关系,和枸杞多糖(LBP)对上述变化的影响.方法 体外培养RF/6As,分为等渗葡萄糖处理组(对照组)、40mmol/L葡萄糖处理组(高糖组)及LBP+40mmol/L葡萄糖处理组(LBP+高糖组).各组分别培养1、3、5、7d,应用倒置显微镜观察培养的RF/6As形态,以辣根过氧化物酶(HRP)作为示踪剂用二室弥散系统检测RF/6As单层通透性的变化,应用免疫荧光法观察各组不同时间点细胞骨架的变化,采用Western blot法检测ROCK1在5d、7d各组细胞中的表达量.结果 第3、5、7天,高糖组RF/6As随时间延长逐渐变形,正常细胞数量明显减少,单层通透性逐渐增加;3个时间点HRP的A值分别为0.074±0.011、0.135±0.022、0.253±0.047,明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).LBP+高糖组仅于7d时细胞形态略有改变,5d及7d时HRP的A值分别为0.069±0.004和0.114±0.009,较对照组明显增加,差异均有统计学意义(P＜0.01);但明显低于高糖组,差异均有统计学意义(P＜0.01).Western blot检测显示,7d时LBP+高糖组ROCK1灰度值为35849.47±1032.36,高糖组为21356.10±1566.66,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 高糖可引起RF/6As单层通透性增加和细胞骨架的重排以及ROCK1的高表达,而LBP可通过下调ROCK1的表达减轻高糖对RF/6As的损伤.
目的 探討高糖條件下猴脈絡膜-視網膜內皮細胞(RF/6As)損傷時的單層通透性、Rho激酶1(ROCK1)的變化及它們之間的關繫,和枸杞多糖(LBP)對上述變化的影響.方法 體外培養RF/6As,分為等滲葡萄糖處理組(對照組)、40mmol/L葡萄糖處理組(高糖組)及LBP+40mmol/L葡萄糖處理組(LBP+高糖組).各組分彆培養1、3、5、7d,應用倒置顯微鏡觀察培養的RF/6As形態,以辣根過氧化物酶(HRP)作為示蹤劑用二室瀰散繫統檢測RF/6As單層通透性的變化,應用免疫熒光法觀察各組不同時間點細胞骨架的變化,採用Western blot法檢測ROCK1在5d、7d各組細胞中的錶達量.結果 第3、5、7天,高糖組RF/6As隨時間延長逐漸變形,正常細胞數量明顯減少,單層通透性逐漸增加;3箇時間點HRP的A值分彆為0.074±0.011、0.135±0.022、0.253±0.047,明顯高于對照組,差異均有統計學意義(P＜0.01).LBP+高糖組僅于7d時細胞形態略有改變,5d及7d時HRP的A值分彆為0.069±0.004和0.114±0.009,較對照組明顯增加,差異均有統計學意義(P＜0.01);但明顯低于高糖組,差異均有統計學意義(P＜0.01).Western blot檢測顯示,7d時LBP+高糖組ROCK1灰度值為35849.47±1032.36,高糖組為21356.10±1566.66,差異有統計學意義(P＜0.01).結論 高糖可引起RF/6As單層通透性增加和細胞骨架的重排以及ROCK1的高錶達,而LBP可通過下調ROCK1的錶達減輕高糖對RF/6As的損傷.
목적 탐토고당조건하후맥락막-시망막내피세포(RF/6As)손상시적단층통투성、Rho격매1(ROCK1)적변화급타문지간적관계,화구기다당(LBP)대상술변화적영향.방법 체외배양RF/6As,분위등삼포도당처리조(대조조)、40mmol/L포도당처리조(고당조)급LBP+40mmol/L포도당처리조(LBP+고당조).각조분별배양1、3、5、7d,응용도치현미경관찰배양적RF/6As형태,이랄근과양화물매(HRP)작위시종제용이실미산계통검측RF/6As단층통투성적변화,응용면역형광법관찰각조불동시간점세포골가적변화,채용Western blot법검측ROCK1재5d、7d각조세포중적표체량.결과 제3、5、7천,고당조RF/6As수시간연장축점변형,정상세포수량명현감소,단층통투성축점증가;3개시간점HRP적A치분별위0.074±0.011、0.135±0.022、0.253±0.047,명현고우대조조,차이균유통계학의의(P＜0.01).LBP+고당조부우7d시세포형태략유개변,5d급7d시HRP적A치분별위0.069±0.004화0.114±0.009,교대조조명현증가,차이균유통계학의의(P＜0.01);단명현저우고당조,차이균유통계학의의(P＜0.01).Western blot검측현시,7d시LBP+고당조ROCK1회도치위35849.47±1032.36,고당조위21356.10±1566.66,차이유통계학의의(P＜0.01).결론 고당가인기RF/6As단층통투성증가화세포골가적중배이급ROCK1적고표체,이LBP가통과하조ROCK1적표체감경고당대RF/6As적손상.
