中华实验外科杂志
中華實驗外科雜誌
중화실험외과잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL SURGERY
2006年
6期
709-712
,共4页
石凤梧%蔡文清%陈子英%刘苏%张文立%韩建民%刘志军%王浩
石鳳梧%蔡文清%陳子英%劉囌%張文立%韓建民%劉誌軍%王浩
석봉오%채문청%진자영%류소%장문립%한건민%류지군%왕호
缺血预处理%再灌注损伤%Fas%Caspase-3
缺血預處理%再灌註損傷%Fas%Caspase-3
결혈예처리%재관주손상%Fas%Caspase-3
目的探讨缺血后处理对猪心肌细胞Fas基因蛋白表达及Caspase-3活性的影响.方法24只小型约克猪(体重35～40kg)被随机分为4组.组1(ACC组,n=6):于CPB开始后并行循环45 min,阻断主动脉90 min,开放主动脉后心脏再灌注120 min;组2(pre-con组,n=6):升主动脉阻断前进行心脏缺血预处理(阻断升主动脉5 min、开放10 min,重复3次),余处理与组1相同;组3(post-con组,n=6):并行循环45 min,阻断主动脉90 min,开放主动脉后心脏再灌注120min;再灌注开始进行缺血后处理(阻断升主动脉30 s后开放30 s,重复3次,共3 min);组4(pre-con+post-con组,n=6):升主动脉阻断前进行心脏缺血预处理(阻断升主动脉5 min、开放10 min,重复3次),阻断主动脉90 min,开放主动脉心脏再灌注120 min,再灌注开始进行心肌缺血后处理(阻断升主动脉30 s、开放30 s,重复3次共3 min).在再灌注结束后取左心室全层心肌适量并固定.用原位化学法(TUNEL)观察各组心肌细胞凋亡,流式细胞法检测Fas基因蛋白表达及Caspase-3的活性.在CPB前、缺血90 min、再灌注30、60、120 min采静脉血检测血MDA、SOD水平.结果原位化学法测得心肌细胞凋亡率组2(10.46±0.91)%、组3(9.68±0.59)%和组4(11.35±1.37)%显著低于组1(19.75±1.81)%(P＜0.05);流式细胞法测得Fas,Caspase-3荧光表达指数(FI),组2(1.24±0.13和1.32±0.13)、组3(1.27±0.07和1.33±0.08)和组4(1.27±0.14和1.31±0.12)显著低于组1(1.74±0.11和1.99±0.12)(P＜0.05);与组1相比,MDA血浆浓度组2、组3和组4显著低于组1,而SOD浓度却显著高于组1(P＜0.05).组2、组3和组4上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论Fas、Caspase-3表达改变参与了心肌细胞凋亡及缺血再灌注损伤过程;缺血后处理可以明显减少心肌细胞凋亡,抑制缺血再灌注损伤.心肌细胞凋亡的减少与Fas基因蛋白的下调、抑制Caspase-3活性及氧化应激有关;缺血后处理与缺血预处理相比可以同等程度的减少心肌细胞凋亡.本实验未观察到缺血预处理和缺血后处理的叠加作用.
目的探討缺血後處理對豬心肌細胞Fas基因蛋白錶達及Caspase-3活性的影響.方法24隻小型約剋豬(體重35～40kg)被隨機分為4組.組1(ACC組,n=6):于CPB開始後併行循環45 min,阻斷主動脈90 min,開放主動脈後心髒再灌註120 min;組2(pre-con組,n=6):升主動脈阻斷前進行心髒缺血預處理(阻斷升主動脈5 min、開放10 min,重複3次),餘處理與組1相同;組3(post-con組,n=6):併行循環45 min,阻斷主動脈90 min,開放主動脈後心髒再灌註120min;再灌註開始進行缺血後處理(阻斷升主動脈30 s後開放30 s,重複3次,共3 min);組4(pre-con+post-con組,n=6):升主動脈阻斷前進行心髒缺血預處理(阻斷升主動脈5 min、開放10 min,重複3次),阻斷主動脈90 min,開放主動脈心髒再灌註120 min,再灌註開始進行心肌缺血後處理(阻斷升主動脈30 s、開放30 s,重複3次共3 min).在再灌註結束後取左心室全層心肌適量併固定.用原位化學法(TUNEL)觀察各組心肌細胞凋亡,流式細胞法檢測Fas基因蛋白錶達及Caspase-3的活性.在CPB前、缺血90 min、再灌註30、60、120 min採靜脈血檢測血MDA、SOD水平.結果原位化學法測得心肌細胞凋亡率組2(10.46±0.91)%、組3(9.68±0.59)%和組4(11.35±1.37)%顯著低于組1(19.75±1.81)%(P＜0.05);流式細胞法測得Fas,Caspase-3熒光錶達指數(FI),組2(1.24±0.13和1.32±0.13)、組3(1.27±0.07和1.33±0.08)和組4(1.27±0.14和1.31±0.12)顯著低于組1(1.74±0.11和1.99±0.12)(P＜0.05);與組1相比,MDA血漿濃度組2、組3和組4顯著低于組1,而SOD濃度卻顯著高于組1(P＜0.05).組2、組3和組4上述指標差異無統計學意義(P＞0.05).結論Fas、Caspase-3錶達改變參與瞭心肌細胞凋亡及缺血再灌註損傷過程;缺血後處理可以明顯減少心肌細胞凋亡,抑製缺血再灌註損傷.心肌細胞凋亡的減少與Fas基因蛋白的下調、抑製Caspase-3活性及氧化應激有關;缺血後處理與缺血預處理相比可以同等程度的減少心肌細胞凋亡.本實驗未觀察到缺血預處理和缺血後處理的疊加作用.
목적탐토결혈후처리대저심기세포Fas기인단백표체급Caspase-3활성적영향.방법24지소형약극저(체중35～40kg)피수궤분위4조.조1(ACC조,n=6):우CPB개시후병행순배45 min,조단주동맥90 min,개방주동맥후심장재관주120 min;조2(pre-con조,n=6):승주동맥조단전진행심장결혈예처리(조단승주동맥5 min、개방10 min,중복3차),여처리여조1상동;조3(post-con조,n=6):병행순배45 min,조단주동맥90 min,개방주동맥후심장재관주120min;재관주개시진행결혈후처리(조단승주동맥30 s후개방30 s,중복3차,공3 min);조4(pre-con+post-con조,n=6):승주동맥조단전진행심장결혈예처리(조단승주동맥5 min、개방10 min,중복3차),조단주동맥90 min,개방주동맥심장재관주120 min,재관주개시진행심기결혈후처리(조단승주동맥30 s、개방30 s,중복3차공3 min).재재관주결속후취좌심실전층심기괄량병고정.용원위화학법(TUNEL)관찰각조심기세포조망,류식세포법검측Fas기인단백표체급Caspase-3적활성.재CPB전、결혈90 min、재관주30、60、120 min채정맥혈검측혈MDA、SOD수평.결과원위화학법측득심기세포조망솔조2(10.46±0.91)%、조3(9.68±0.59)%화조4(11.35±1.37)%현저저우조1(19.75±1.81)%(P＜0.05);류식세포법측득Fas,Caspase-3형광표체지수(FI),조2(1.24±0.13화1.32±0.13)、조3(1.27±0.07화1.33±0.08)화조4(1.27±0.14화1.31±0.12)현저저우조1(1.74±0.11화1.99±0.12)(P＜0.05);여조1상비,MDA혈장농도조2、조3화조4현저저우조1,이SOD농도각현저고우조1(P＜0.05).조2、조3화조4상술지표차이무통계학의의(P＞0.05).결론Fas、Caspase-3표체개변삼여료심기세포조망급결혈재관주손상과정;결혈후처리가이명현감소심기세포조망,억제결혈재관주손상.심기세포조망적감소여Fas기인단백적하조、억제Caspase-3활성급양화응격유관;결혈후처리여결혈예처리상비가이동등정도적감소심기세포조망.본실험미관찰도결혈예처리화결혈후처리적첩가작용.
