黑龙江畜牧兽医
黑龍江畜牧獸醫
흑룡강축목수의
HEILONGJIANG JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE AND VETERINARY MEDICINE
2006年
7期
18-20
,共3页
张桂红%林海波%江经纬%詹国英%廖明
張桂紅%林海波%江經緯%詹國英%廖明
장계홍%림해파%강경위%첨국영%료명
猪%白细胞介素-6%基因克隆%序列分析
豬%白細胞介素-6%基因剋隆%序列分析
저%백세포개소-6%기인극륭%서렬분석
分离猪(杜长大三元杂)外周血单核细胞(PBMC)进行体外培养,经诱导剂LPS或ConA的诱导培养48 h后,提取细胞总RNA,应用RT-PCR扩增猪IL-基因,并克隆到pMD18-T载体后测序.结果成功获得猪IL-6基因重组质粒pMDpIL-6,序列分析发现所获得的猪IL-6cDNA长度为716 bp,开放阅读框为636 bp,编码211个氨基酸,相对分子质量约24 ku,等电点5.5.所获得的猪IL-6与GenBank上已报道的不同来源猪的IL-6有单个氨基酸存在差异;与人和其他动物IL-6氨基酸序列的同源性为78.1%～90.1%,同时反映出IL-6基因具有种的多样性,不同种动物的IL-6基因亲缘关系越近,进化关系也越近.
分離豬(杜長大三元雜)外週血單覈細胞(PBMC)進行體外培養,經誘導劑LPS或ConA的誘導培養48 h後,提取細胞總RNA,應用RT-PCR擴增豬IL-基因,併剋隆到pMD18-T載體後測序.結果成功穫得豬IL-6基因重組質粒pMDpIL-6,序列分析髮現所穫得的豬IL-6cDNA長度為716 bp,開放閱讀框為636 bp,編碼211箇氨基痠,相對分子質量約24 ku,等電點5.5.所穫得的豬IL-6與GenBank上已報道的不同來源豬的IL-6有單箇氨基痠存在差異;與人和其他動物IL-6氨基痠序列的同源性為78.1%～90.1%,同時反映齣IL-6基因具有種的多樣性,不同種動物的IL-6基因親緣關繫越近,進化關繫也越近.
분리저(두장대삼원잡)외주혈단핵세포(PBMC)진행체외배양,경유도제LPS혹ConA적유도배양48 h후,제취세포총RNA,응용RT-PCR확증저IL-기인,병극륭도pMD18-T재체후측서.결과성공획득저IL-6기인중조질립pMDpIL-6,서렬분석발현소획득적저IL-6cDNA장도위716 bp,개방열독광위636 bp,편마211개안기산,상대분자질량약24 ku,등전점5.5.소획득적저IL-6여GenBank상이보도적불동래원저적IL-6유단개안기산존재차이;여인화기타동물IL-6안기산서렬적동원성위78.1%～90.1%,동시반영출IL-6기인구유충적다양성,불동충동물적IL-6기인친연관계월근,진화관계야월근.
