CAJ | 학술논문

糖组学方法筛查人肝癌细胞转移过程中发挥重要作用的核心岩藻糖基化蛋白质分子,解析比较筛出的差异蛋白--细胞角蛋白8(CK8)翻译及糖基化修饰改变与人肝癌细胞转移潜能的关系.应用双向电泳(2-DE)、凝集素亲和印迹、凝集素亲和沉淀联合质谱分析技术,筛查并验证与肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白;应用细胞免疫荧光和蛋白质免疫印迹检测CK8的蛋白质表达情况;应用免疫沉淀结合多种凝集素亲和印迹,推测其与肝癌转移相关的寡糖链结构改变.研究发现,3种不同转移潜能人肝癌细胞Hep3B、MHCC97-L和MHCC97-H的扁豆凝集素(LCA)亲和印迹表达谱中,分子质量55～60 ku、等电点4～6区域处有核心岩藻糖基化蛋白呈差异表达,质谱鉴定为CK8.LCA亲和沉淀及蛋白质印迹进一步验证CK8异常核心岩藻糖基化与肝癌转移相关;研究发现,CK8分布于细胞浆内,在MHCC97-L和MHCC97-H细胞中蛋白质表达水平较Hep3B高,在MHCC97-H中与LCA和蓖麻凝集素(RCA-1)的亲和力较Hep3B强.以上结果提示,2-DE和凝集素印迹技术联合MALDI-TOF-MS/MS分析可用于筛查疾病过程相关的异常糖基化蛋白质分子,CK8蛋白水平、核心岩藻糖基化及β-1,4末端半乳糖基化的增加均与肝癌细胞转移潜能相关.
당조학방법사사인간암세포전이과정중발휘중요작용적핵심암조당기화단백질분자,해석비교사출적차이단백--세포각단백8(CK8)번역급당기화수식개변여인간암세포전이잠능적관계.응용쌍향전영(2-DE)、응집소친화인적、응집소친화침정연합질보분석기술,사사병험증여간암전이상관적핵심암조당기화단백;응용세포면역형광화단백질면역인적검측CK8적단백질표체정황;응용면역침정결합다충응집소친화인적,추측기여간암전이상관적과당련결구개변.연구발현,3충불동전이잠능인간암세포Hep3B、MHCC97-L화MHCC97-H적편두응집소(LCA)친화인적표체보중,분자질량55～60 ku、등전점4～6구역처유핵심암조당기화단백정차이표체,질보감정위CK8.LCA친화침정급단백질인적진일보험증CK8이상핵심암조당기화여간암전이상관;연구발현,CK8분포우세포장내,재MHCC97-L화MHCC97-H세포중단백질표체수평교Hep3B고,재MHCC97-H중여LCA화비마응집소(RCA-1)적친화력교Hep3B강.이상결과제시,2-DE화응집소인적기술연합MALDI-TOF-MS/MS분석가용우사사질병과정상관적이상당기화단백질분자,CK8단백수평、핵심암조당기화급β-1,4말단반유당기화적증가균여간암세포전이잠능상관.