安徽医学
安徽醫學
안휘의학
ANHUI MEDICAL JOURNAL
2008年
5期
522-526
,共5页
余佩英%郑治秀%蔡智玲%臧竟红%姚小飞%江莉%陈吉庆%陆超%管亚飞
餘珮英%鄭治秀%蔡智玲%臧竟紅%姚小飛%江莉%陳吉慶%陸超%管亞飛
여패영%정치수%채지령%장경홍%요소비%강리%진길경%륙초%관아비
谷氨酸%骨髓间质干细胞%凋亡%Smac基因
穀氨痠%骨髓間質榦細胞%凋亡%Smac基因
곡안산%골수간질간세포%조망%Smac기인
目的 探讨骨髓干细胞(BMSCs)经谷氨酸培养后Smac基因表达情况及其是否参与了谷氨酸诱导的BMSCs凋亡调控.方法 将原代培养的大鼠骨髓间充质干细胞,用流式细胞术鉴定细胞表型;加入30mmol/L谷氨酸培养后,采用DAPI荧光染色法,观察凋亡细胞的形态;用PI/Annexin-V双染法流式细胞仪计数各组(0、10、30、50 mmoL/L谷氨酸组)凋亡细胞的比例,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察经30 mmoL/L、50 mmol/L谷氨酸作用24 h后Smac基因mRNA的表达变化.结果 培养的BMSCs经流式细胞术鉴定发现:CD29,CD44和CD105表达阳性,CD45.CD14和CD34表达阴性,具备BMSCs的特征;经谷氨酸培养后,可见BMSCs细胞核皱缩,边聚,双核状;谷氨酸诱导组较多细胞呈凋亡改变,且随着谷氨酸浓度的增加,凋亡细胞的百分率也相应地增加(分别为14.24%、30.72%、93.31%);RT-PCR法发现经30和50 mmol/L谷氨酸作用后,BMSCs Smac基因表达较对照组升高(P<0.05),且随着谷氨酸浓度的增加,Smac基因表达也相应增加.结论 BMSCs经谷氨酸培养后Smac基因存在高表达,它可能参与了谷氨酸诱导的BMSCs凋亡调控.
目的 探討骨髓榦細胞(BMSCs)經穀氨痠培養後Smac基因錶達情況及其是否參與瞭穀氨痠誘導的BMSCs凋亡調控.方法 將原代培養的大鼠骨髓間充質榦細胞,用流式細胞術鑒定細胞錶型;加入30mmol/L穀氨痠培養後,採用DAPI熒光染色法,觀察凋亡細胞的形態;用PI/Annexin-V雙染法流式細胞儀計數各組(0、10、30、50 mmoL/L穀氨痠組)凋亡細胞的比例,通過逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)觀察經30 mmoL/L、50 mmol/L穀氨痠作用24 h後Smac基因mRNA的錶達變化.結果 培養的BMSCs經流式細胞術鑒定髮現:CD29,CD44和CD105錶達暘性,CD45.CD14和CD34錶達陰性,具備BMSCs的特徵;經穀氨痠培養後,可見BMSCs細胞覈皺縮,邊聚,雙覈狀;穀氨痠誘導組較多細胞呈凋亡改變,且隨著穀氨痠濃度的增加,凋亡細胞的百分率也相應地增加(分彆為14.24%、30.72%、93.31%);RT-PCR法髮現經30和50 mmol/L穀氨痠作用後,BMSCs Smac基因錶達較對照組升高(P<0.05),且隨著穀氨痠濃度的增加,Smac基因錶達也相應增加.結論 BMSCs經穀氨痠培養後Smac基因存在高錶達,它可能參與瞭穀氨痠誘導的BMSCs凋亡調控.
목적 탐토골수간세포(BMSCs)경곡안산배양후Smac기인표체정황급기시부삼여료곡안산유도적BMSCs조망조공.방법 장원대배양적대서골수간충질간세포,용류식세포술감정세포표형;가입30mmol/L곡안산배양후,채용DAPI형광염색법,관찰조망세포적형태;용PI/Annexin-V쌍염법류식세포의계수각조(0、10、30、50 mmoL/L곡안산조)조망세포적비례,통과역전록취합매련반응(RT-PCR)관찰경30 mmoL/L、50 mmol/L곡안산작용24 h후Smac기인mRNA적표체변화.결과 배양적BMSCs경류식세포술감정발현:CD29,CD44화CD105표체양성,CD45.CD14화CD34표체음성,구비BMSCs적특정;경곡안산배양후,가견BMSCs세포핵추축,변취,쌍핵상;곡안산유도조교다세포정조망개변,차수착곡안산농도적증가,조망세포적백분솔야상응지증가(분별위14.24%、30.72%、93.31%);RT-PCR법발현경30화50 mmol/L곡안산작용후,BMSCs Smac기인표체교대조조승고(P<0.05),차수착곡안산농도적증가,Smac기인표체야상응증가.결론 BMSCs경곡안산배양후Smac기인존재고표체,타가능삼여료곡안산유도적BMSCs조망조공.
