热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2011年
7期
1347-1351
,共5页
庹德财%沈文涛%高乐%言普%周鹏
庹德財%瀋文濤%高樂%言普%週鵬
탁덕재%침문도%고악%언보%주붕
番木瓜环斑病病毒:全长基因组cDNA%克隆与测序
番木瓜環斑病病毒:全長基因組cDNA%剋隆與測序
번목과배반병병독:전장기인조cDNA%극륭여측서
以植物总RNA提取试剂盒提取的高纯度的总RNA为模板,使用Oligo dT-Adaptor和Random9引物合成了番木瓜环斑病病毒海南分离物(PRSV HN-2)的cDNA第一链,基于已报道的PRSV全长基因组序列,设计合成了一对引物,一步法RT-PCR扩增出PRSV海南分离物全长基因组cDNA.为了验证获得的全长基因组cDNA的正确性,并以扩增出的全长cDNA为模板,将PRSV全长基因组分成A、B2个大片段进行扩增,应用T载体进行克隆和测序以验证所获得的全长基因组cDNA序列的正确性.测序结果显示,该cDNA序列与国内外报道的PRSV各分离物全长核苷酸序列的相似性很高,表明本文建立的一步法RT-PCR扩增PRSV全长基因组cDNA的方法正确、可行.
以植物總RNA提取試劑盒提取的高純度的總RNA為模闆,使用Oligo dT-Adaptor和Random9引物閤成瞭番木瓜環斑病病毒海南分離物(PRSV HN-2)的cDNA第一鏈,基于已報道的PRSV全長基因組序列,設計閤成瞭一對引物,一步法RT-PCR擴增齣PRSV海南分離物全長基因組cDNA.為瞭驗證穫得的全長基因組cDNA的正確性,併以擴增齣的全長cDNA為模闆,將PRSV全長基因組分成A、B2箇大片段進行擴增,應用T載體進行剋隆和測序以驗證所穫得的全長基因組cDNA序列的正確性.測序結果顯示,該cDNA序列與國內外報道的PRSV各分離物全長覈苷痠序列的相似性很高,錶明本文建立的一步法RT-PCR擴增PRSV全長基因組cDNA的方法正確、可行.
이식물총RNA제취시제합제취적고순도적총RNA위모판,사용Oligo dT-Adaptor화Random9인물합성료번목과배반병병독해남분리물(PRSV HN-2)적cDNA제일련,기우이보도적PRSV전장기인조서렬,설계합성료일대인물,일보법RT-PCR확증출PRSV해남분리물전장기인조cDNA.위료험증획득적전장기인조cDNA적정학성,병이확증출적전장cDNA위모판,장PRSV전장기인조분성A、B2개대편단진행확증,응용T재체진행극륭화측서이험증소획득적전장기인조cDNA서렬적정학성.측서결과현시,해cDNA서렬여국내외보도적PRSV각분리물전장핵감산서렬적상사성흔고,표명본문건립적일보법RT-PCR확증PRSV전장기인조cDNA적방법정학、가행.
