中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2012年
4期
428-434
,共7页
吕立婷%洪炀%彭金彪%张娟%付志强%林矫矫
呂立婷%洪煬%彭金彪%張娟%付誌彊%林矯矯
려립정%홍양%팽금표%장연%부지강%림교교
日本血吸虫%肌醇单磷酸酶%克隆%免疫保护
日本血吸蟲%肌醇單燐痠酶%剋隆%免疫保護
일본혈흡충%기순단린산매%극륭%면역보호
目的 克隆并表达日本血吸虫肌醇单磷酸酶(SjIM)编码基因cDNA,评估该重组抗原抗血吸虫感染的免疫保护效果.方法 以日本血吸虫42d虫体cDNA为模板,经PCR扩增编码SjIM蛋白的开放阅读框(ORF)基因片段.采用荧光实时定量PCR分析该基因在童虫和成虫的表达情况.以pET28a(+)为载体构建重组表达质粒,经异丙基- β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导,制备重组SjIM蛋白.Western blotting检测重组蛋白的抗原性与免疫原性,利用重组SjIM抗原免疫小鼠评估其免疫保护效果.结果 获得了编码SjIM基因ORF的cDNA片段,ORF长度为834 bp,编码278个氨基酸.荧光实时定量PCR显示该基因在35 d虫体中表达量最高.获得了SjIM重组蛋白,其具有良好的免疫原性.免疫组小鼠获得48.76％的减虫率和41.29％的肝脏减卵率.结论 获得了日本血吸虫SjIM基因ORF的cDNA序列,并制备了重组SjIM蛋白,该重组抗原在小鼠体内能诱导产生部分抗血吸虫感染的免疫保护效果.
目的 剋隆併錶達日本血吸蟲肌醇單燐痠酶(SjIM)編碼基因cDNA,評估該重組抗原抗血吸蟲感染的免疫保護效果.方法 以日本血吸蟲42d蟲體cDNA為模闆,經PCR擴增編碼SjIM蛋白的開放閱讀框(ORF)基因片段.採用熒光實時定量PCR分析該基因在童蟲和成蟲的錶達情況.以pET28a(+)為載體構建重組錶達質粒,經異丙基- β-D-硫代吡喃半乳糖苷誘導,製備重組SjIM蛋白.Western blotting檢測重組蛋白的抗原性與免疫原性,利用重組SjIM抗原免疫小鼠評估其免疫保護效果.結果 穫得瞭編碼SjIM基因ORF的cDNA片段,ORF長度為834 bp,編碼278箇氨基痠.熒光實時定量PCR顯示該基因在35 d蟲體中錶達量最高.穫得瞭SjIM重組蛋白,其具有良好的免疫原性.免疫組小鼠穫得48.76％的減蟲率和41.29％的肝髒減卵率.結論 穫得瞭日本血吸蟲SjIM基因ORF的cDNA序列,併製備瞭重組SjIM蛋白,該重組抗原在小鼠體內能誘導產生部分抗血吸蟲感染的免疫保護效果.
목적 극륭병표체일본혈흡충기순단린산매(SjIM)편마기인cDNA,평고해중조항원항혈흡충감염적면역보호효과.방법 이일본혈흡충42d충체cDNA위모판,경PCR확증편마SjIM단백적개방열독광(ORF)기인편단.채용형광실시정량PCR분석해기인재동충화성충적표체정황.이pET28a(+)위재체구건중조표체질립,경이병기- β-D-류대필남반유당감유도,제비중조SjIM단백.Western blotting검측중조단백적항원성여면역원성,이용중조SjIM항원면역소서평고기면역보호효과.결과 획득료편마SjIM기인ORF적cDNA편단,ORF장도위834 bp,편마278개안기산.형광실시정량PCR현시해기인재35 d충체중표체량최고.획득료SjIM중조단백,기구유량호적면역원성.면역조소서획득48.76％적감충솔화41.29％적간장감란솔.결론 획득료일본혈흡충SjIM기인ORF적cDNA서렬,병제비료중조SjIM단백,해중조항원재소서체내능유도산생부분항혈흡충감염적면역보호효과.
