CAJ | 학술논문

目的探讨树突状细胞(DC)在肾小管间质炎症损伤中的作用,以及抗P-选择素功能域单抗(PsL-EGFmAb)对DC浸润及体外成熟与功能的干预调节.方法 (1)建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型.分别采用免疫组化和免疫双染与图像分析,观察P-选择素及CD1a+CD80+DC在肾组织表达和分布变化.(2)从脐血CD34+造血干细胞中诱导扩增DC,并于成熟过程中采用流式细胞仪分析细胞表面分子表达;RT-PCR检测细胞NF-κB P50、P65 mRNA表达;混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC对T细胞刺激能力;以及ELISA测定MLR上清液IL-12 p70分泌含量.结果 (1)与假手术组比较,UUO大鼠从第1天起,随着P-选择素以肾小管上皮细胞为主的小管间质表达,CD1a+CD80+DC以肾间质为主浸润;至第7天P-选择素上调且CD1a+CD80+DC显著聚集,两者明显相关且与肾小管间质病变程度显著相关.经PsL-EGFmAb处理后,大鼠肾组织P-选择素表达下调,CD1a+CD80+DC浸润减少,且肾小管间质损害程度减轻.(2)经TNF-α刺激炎性状态下,培养人DC成熟过程中基本不表达或低表达P-选择素,但持续高表达与P-选择素同属C型凝集素的DC-SIGN.经PsL-EGFmAb处理后,可明显抑制DC-SIGN及细胞内NF-κB基因表达,并相应抑制DC黏附共刺激分子表达、IL-12分泌及刺激T细胞增殖能力.结论 DC也是肾小管间质炎症病变启动因素,针对P-选择素功能域的单抗对其浸润具抑制作用.此外,该单抗对人DC成熟与功能有调节效应,提示与抑制作为DC模式识别及黏附受体的DC-SIGN有关,并可能通过影响NF-κB途径起作用.
목적 탐토수돌상세포(DC)재신소관간질염증손상중적작용,이급항P-선택소공능역단항(PsL-EGFmAb)대DC침윤급체외성숙여공능적간예조절.방법 (1)건립대서단측수뇨관경조(UUO)모형.분별채용면역조화화면역쌍염여도상분석,관찰P-선택소급CD1a+CD80+DC재신조직표체화분포변화.(2)종제혈CD34+조혈간세포중유도확증DC,병우성숙과정중채용류식세포의분석세포표면분자표체;RT-PCR검측세포NF-κB P50、P65 mRNA표체;혼합림파세포반응(MLR)검측DC대T세포자격능력;이급ELISA측정MLR상청액IL-12 p70분비함량.결과 (1)여가수술조비교,UUO대서종제1천기,수착P-선택소이신소관상피세포위주적소관간질표체,CD1a+CD80+DC이신간질위주침윤;지제7천P-선택소상조차CD1a+CD80+DC현저취집,량자명현상관차여신소관간질병변정도현저상관.경PsL-EGFmAb처리후,대서신조직P-선택소표체하조,CD1a+CD80+DC침윤감소,차신소관간질손해정도감경.(2)경TNF-α자격염성상태하,배양인DC성숙과정중기본불표체혹저표체P-선택소,단지속고표체여P-선택소동속C형응집소적DC-SIGN.경PsL-EGFmAb처리후,가명현억제DC-SIGN급세포내NF-κB기인표체,병상응억제DC점부공자격분자표체、IL-12분비급자격T세포증식능력.결론 DC야시신소관간질염증병변계동인소,침대P-선택소공능역적단항대기침윤구억제작용.차외,해단항대인DC성숙여공능유조절효응,제시여억제작위DC모식식별급점부수체적DC-SIGN유관,병가능통과영향NF-κB도경기작용.