应用与环境生物学报
應用與環境生物學報
응용여배경생물학보
CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY
2006年
2期
210-214
,共5页
杨泽宏%杨星勇%罗克明%董玉梅
楊澤宏%楊星勇%囉剋明%董玉梅
양택굉%양성용%라극명%동옥매
小皱蝽%抗菌肽%诱导%分离纯化
小皺蝽%抗菌肽%誘導%分離純化
소추춘%항균태%유도%분리순화
针刺小皱蝽成虫腹部,诱导免疫防御反应,小皱蝽成虫组织经过浸提、浸提液TFA酸化、超速离心、超滤、固相萃取等分离步骤,平板生长抑制试验检测抗菌活性.在C18 Sep-Pak固相萃取柱上,40%ACN洗脱组分为初样品,经RP-HPLC、GPC-HPLC及填料孔径更小的反相色谱柱纯化,得到0.452 mg AMP-2样品.琼脂孔扩散法检测AMP-2抗菌活性,回收率为4.04%.抗菌肽AMP-2在Superdex Peptide凝胶过滤柱上测得分子量(Mr)为3.2×103,茚三酮反应紫色.AMP-2具有一定热稳定性,在pH 3~8的乙酸铵缓冲液中抗菌活性强,对检测的动植物病原菌具有广谱抗菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌D22、枯草芽孢杆菌的MIC值为2.5μg/mL,对四联球菌的MIC值为5.0μg/mL,AMP-2可能为富含脯氨酸的小分子抗菌肽.图3表2参11
針刺小皺蝽成蟲腹部,誘導免疫防禦反應,小皺蝽成蟲組織經過浸提、浸提液TFA痠化、超速離心、超濾、固相萃取等分離步驟,平闆生長抑製試驗檢測抗菌活性.在C18 Sep-Pak固相萃取柱上,40%ACN洗脫組分為初樣品,經RP-HPLC、GPC-HPLC及填料孔徑更小的反相色譜柱純化,得到0.452 mg AMP-2樣品.瓊脂孔擴散法檢測AMP-2抗菌活性,迴收率為4.04%.抗菌肽AMP-2在Superdex Peptide凝膠過濾柱上測得分子量(Mr)為3.2×103,茚三酮反應紫色.AMP-2具有一定熱穩定性,在pH 3~8的乙痠銨緩遲液中抗菌活性彊,對檢測的動植物病原菌具有廣譜抗菌活性,對金黃色葡萄毬菌、大腸桿菌D22、枯草芽孢桿菌的MIC值為2.5μg/mL,對四聯毬菌的MIC值為5.0μg/mL,AMP-2可能為富含脯氨痠的小分子抗菌肽.圖3錶2參11
침자소추춘성충복부,유도면역방어반응,소추춘성충조직경과침제、침제액TFA산화、초속리심、초려、고상췌취등분리보취,평판생장억제시험검측항균활성.재C18 Sep-Pak고상췌취주상,40%ACN세탈조분위초양품,경RP-HPLC、GPC-HPLC급전료공경경소적반상색보주순화,득도0.452 mg AMP-2양품.경지공확산법검측AMP-2항균활성,회수솔위4.04%.항균태AMP-2재Superdex Peptide응효과려주상측득분자량(Mr)위3.2×103,인삼동반응자색.AMP-2구유일정열은정성,재pH 3~8적을산안완충액중항균활성강,대검측적동식물병원균구유엄보항균활성,대금황색포도구균、대장간균D22、고초아포간균적MIC치위2.5μg/mL,대사련구균적MIC치위5.0μg/mL,AMP-2가능위부함포안산적소분자항균태.도3표2삼11