浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2008年
1期
45-49
,共5页
陈立祥%邹增丁%苏建明%章怀云%肖调义
陳立祥%鄒增丁%囌建明%章懷雲%肖調義
진립상%추증정%소건명%장부운%초조의
草鱼%脂肪酸结合蛋白%基因表达%克隆
草魚%脂肪痠結閤蛋白%基因錶達%剋隆
초어%지방산결합단백%기인표체%극륭
根据GenBank上已发表的其他物种的脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding protein, FABP)基因序列设计1对引物,从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)cDNA文库中扩增出脂肪酸结合蛋白基因,定向克隆于表达质粒载体pET32A中构建成pET32A-FABP重组体,将重组体转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,以终浓度1 mmol·L-1的IPTG对其进行诱导表达.表达产物经SDS-PAGE电泳分析表明,与阴性对照相比,阳性克隆在分子量33 kDa处有1条明显的蛋白带,大小与预期结果一致.经光密度分析可知,目的蛋白约占总可溶性蛋白的49.5%.这为进一步研究脂肪酸结合蛋白生物学特性以及FABP基因对脂肪代谢调控规律奠定了基础.
根據GenBank上已髮錶的其他物種的脂肪痠結閤蛋白(fatty acid-binding protein, FABP)基因序列設計1對引物,從草魚(Ctenopharyngodon idellus)cDNA文庫中擴增齣脂肪痠結閤蛋白基因,定嚮剋隆于錶達質粒載體pET32A中構建成pET32A-FABP重組體,將重組體轉化至大腸桿菌BL21(DE3)中,以終濃度1 mmol·L-1的IPTG對其進行誘導錶達.錶達產物經SDS-PAGE電泳分析錶明,與陰性對照相比,暘性剋隆在分子量33 kDa處有1條明顯的蛋白帶,大小與預期結果一緻.經光密度分析可知,目的蛋白約佔總可溶性蛋白的49.5%.這為進一步研究脂肪痠結閤蛋白生物學特性以及FABP基因對脂肪代謝調控規律奠定瞭基礎.
근거GenBank상이발표적기타물충적지방산결합단백(fatty acid-binding protein, FABP)기인서렬설계1대인물,종초어(Ctenopharyngodon idellus)cDNA문고중확증출지방산결합단백기인,정향극륭우표체질립재체pET32A중구건성pET32A-FABP중조체,장중조체전화지대장간균BL21(DE3)중,이종농도1 mmol·L-1적IPTG대기진행유도표체.표체산물경SDS-PAGE전영분석표명,여음성대조상비,양성극륭재분자량33 kDa처유1조명현적단백대,대소여예기결과일치.경광밀도분석가지,목적단백약점총가용성단백적49.5%.저위진일보연구지방산결합단백생물학특성이급FABP기인대지방대사조공규률전정료기출.
