江西农业大学学报
江西農業大學學報
강서농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS JIANGXIENSIS
2008年
3期
385-389
,共5页
陈黎龙%江青艳%朱晓彤%束刚%高淑静%高萍%张永亮
陳黎龍%江青豔%硃曉彤%束剛%高淑靜%高萍%張永亮
진려룡%강청염%주효동%속강%고숙정%고평%장영량
鸡%肝细胞%分离%原代培养
鷄%肝細胞%分離%原代培養
계%간세포%분리%원대배양
以8～10周龄的雄性黄羽鸡为对象,比较了原位两步胶原酶灌流法、改良的原位两步灌流法及原位一步灌流结合组织块消化法对成年鸡肝细胞的分离效果,同时比较了不同基础培养液对成年鸡肝细胞体外培养的影响.结果表明,采用改良的原位两步灌流法可以获得分离效果很好,均匀一致且活率达90%以上的肝细胞;以Williams' medium E为基础培养液,以1×105个/cm2密度接种,4h后肝细胞贴壁,随后在含ψ=7%新生牛血清的培养液中培养24h后,肝上皮细胞呈现典型的多角形,核圆透亮,聚集呈岛屿状生长,48h后增殖旺盛,96h后基本铺满培养皿底部,出现胆小管样结构,并可维持存活13d以上.本试验为进一步建立成年鸡肝细胞无血清培养体系,体外研究其功能奠定了基础.
以8～10週齡的雄性黃羽鷄為對象,比較瞭原位兩步膠原酶灌流法、改良的原位兩步灌流法及原位一步灌流結閤組織塊消化法對成年鷄肝細胞的分離效果,同時比較瞭不同基礎培養液對成年鷄肝細胞體外培養的影響.結果錶明,採用改良的原位兩步灌流法可以穫得分離效果很好,均勻一緻且活率達90%以上的肝細胞;以Williams' medium E為基礎培養液,以1×105箇/cm2密度接種,4h後肝細胞貼壁,隨後在含ψ=7%新生牛血清的培養液中培養24h後,肝上皮細胞呈現典型的多角形,覈圓透亮,聚集呈島嶼狀生長,48h後增殖旺盛,96h後基本鋪滿培養皿底部,齣現膽小管樣結構,併可維持存活13d以上.本試驗為進一步建立成年鷄肝細胞無血清培養體繫,體外研究其功能奠定瞭基礎.
이8～10주령적웅성황우계위대상,비교료원위량보효원매관류법、개량적원위량보관류법급원위일보관류결합조직괴소화법대성년계간세포적분리효과,동시비교료불동기출배양액대성년계간세포체외배양적영향.결과표명,채용개량적원위량보관류법가이획득분리효과흔호,균균일치차활솔체90%이상적간세포;이Williams' medium E위기출배양액,이1×105개/cm2밀도접충,4h후간세포첩벽,수후재함ψ=7%신생우혈청적배양액중배양24h후,간상피세포정현전형적다각형,핵원투량,취집정도서상생장,48h후증식왕성,96h후기본포만배양명저부,출현담소관양결구,병가유지존활13d이상.본시험위진일보건립성년계간세포무혈청배양체계,체외연구기공능전정료기출.
