CAJ | 학술논문

背景与目的:缺氧诱导因子-1α(1aypoxia-indueible factor-lα, HIF-1α)是细胞对缺氧应答的一个重要的转录因子,目前对缺氧条件下血液系统恶性肿瘤,尤其是白血病生物学改变的研究相对较少.本研究探讨应用RNA干扰技术抑制HIF-1α在慢性粒细胞白血病细胞系K562中的表达后,细胞对化疗药物高三尖杉酯碱(homoharringtonine, HHT)敏感性的变化.方法:利用shRNA表达载pSilencer 2.1-U6 hygro构建RNA干扰载体,在K562细胞中抑制HIF-1α的表达,潮霉素筛选获得阳性克隆.应用实时定量RT-PCR技术研究缺氧(1% O2分压)条件下,抑制HIF-1α的表达对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase, PGK)、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,Glut-1)和P-糖蛋白(P-glycoprotein, P-gp)表达的影响.应用MTT比色法观察抑制HIF-1α表达后,K562细胞对HHT敏感性的变化.结果:转染后HIF-1α在mRNA和蛋白水平的表达均被抑制,缺氧条件下HIF-1α的靶基因VEGF、PGK、Glut-l、P-gp等表达明显下调.HIF-1α被干扰后的K562细胞对HHT的敏感性增加.结论:抑制K562细胞的HIF-1α表达可以抑制血管生成和糖代谢相关基因表达,并且增加对HHT的敏感性.
배경여목적:결양유도인자-1α(1aypoxia-indueible factor-lα, HIF-1α)시세포대결양응답적일개중요적전록인자,목전대결양조건하혈액계통악성종류,우기시백혈병생물학개변적연구상대교소.본연구탐토응용RNA간우기술억제HIF-1α재만성립세포백혈병세포계K562중적표체후,세포대화료약물고삼첨삼지감(homoharringtonine, HHT)민감성적변화.방법:이용shRNA표체재pSilencer 2.1-U6 hygro구건RNA간우재체,재K562세포중억제HIF-1α적표체,조매소사선획득양성극륭.응용실시정량RT-PCR기술연구결양(1% O2분압)조건하,억제HIF-1α적표체대혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF)、린산감유산격매(phosphoglycerate kinase, PGK)、포도당전운단백-1(glucose transporter-1,Glut-1)화P-당단백(P-glycoprotein, P-gp)표체적영향.응용MTT비색법관찰억제HIF-1α표체후,K562세포대HHT민감성적변화.결과:전염후HIF-1α재mRNA화단백수평적표체균피억제,결양조건하HIF-1α적파기인VEGF、PGK、Glut-l、P-gp등표체명현하조.HIF-1α피간우후적K562세포대HHT적민감성증가.결론:억제K562세포적HIF-1α표체가이억제혈관생성화당대사상관기인표체,병차증가대HHT적민감성.