西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2010年
4期
603-606,609
,共5页
蒋小梅%廖婷婷%章崇杰%张晨阳%魏大鹏
蔣小梅%廖婷婷%章崇傑%張晨暘%魏大鵬
장소매%료정정%장숭걸%장신양%위대붕
人Cu/Zn%SOD%单克隆抗体%腹主动脉瘸
人Cu/Zn%SOD%單剋隆抗體%腹主動脈瘸
인Cu/Zn%SOD%단극륭항체%복주동맥가
目的 制备抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体并对其生物学特性进行簦定.方法 以人Cu/Zn SOD作为免疫原免疫Balb/e小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株.用ELlSA、斑点ELISA、Western Blot、免疫组化鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、亚型及相对亲和力.结果 筛选到一株可稳定分泌抗人Cu/ZnSOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株4H10H4812,亚型鉴定重链为IgG2a,轻链为kappa链.ELISA法测定腹水效价为1:256,000,抗体相对亲和力为1.101×109mol/L.斑点ELISA、Western Blot显示抗体能特异识别免疫原、人肝细胞株HL-7702和人红细胞中的天然Cu/Zn SOD;不与鼠Cu/Zn SOD和人Mn SOD发生交叉反应.免疫组化进一步显示了人Cu/Zn SOD均匀分布于细胞的胞浆中.结论 成功制备了抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体,为进一步研究其与腹主动脉瘤的关系奠定了基础.
目的 製備抗人Cu/Zn SOD單剋隆抗體併對其生物學特性進行簦定.方法 以人Cu/Zn SOD作為免疫原免疫Balb/e小鼠,取其脾細胞與SP2/0細胞融閤,經多次篩選及剋隆化,建立可穩定分泌抗人Cu/Zn SOD單剋隆抗體的雜交瘤細胞株.用ELlSA、斑點ELISA、Western Blot、免疫組化鑒定單剋隆抗體的特性,併測定其效價、亞型及相對親和力.結果 篩選到一株可穩定分泌抗人Cu/ZnSOD單剋隆抗體的雜交瘤細胞株4H10H4812,亞型鑒定重鏈為IgG2a,輕鏈為kappa鏈.ELISA法測定腹水效價為1:256,000,抗體相對親和力為1.101×109mol/L.斑點ELISA、Western Blot顯示抗體能特異識彆免疫原、人肝細胞株HL-7702和人紅細胞中的天然Cu/Zn SOD;不與鼠Cu/Zn SOD和人Mn SOD髮生交扠反應.免疫組化進一步顯示瞭人Cu/Zn SOD均勻分佈于細胞的胞漿中.結論 成功製備瞭抗人Cu/Zn SOD單剋隆抗體,為進一步研究其與腹主動脈瘤的關繫奠定瞭基礎.
목적 제비항인Cu/Zn SOD단극륭항체병대기생물학특성진행등정.방법 이인Cu/Zn SOD작위면역원면역Balb/e소서,취기비세포여SP2/0세포융합,경다차사선급극륭화,건립가은정분비항인Cu/Zn SOD단극륭항체적잡교류세포주.용ELlSA、반점ELISA、Western Blot、면역조화감정단극륭항체적특성,병측정기효개、아형급상대친화력.결과 사선도일주가은정분비항인Cu/ZnSOD단극륭항체적잡교류세포주4H10H4812,아형감정중련위IgG2a,경련위kappa련.ELISA법측정복수효개위1:256,000,항체상대친화력위1.101×109mol/L.반점ELISA、Western Blot현시항체능특이식별면역원、인간세포주HL-7702화인홍세포중적천연Cu/Zn SOD;불여서Cu/Zn SOD화인Mn SOD발생교차반응.면역조화진일보현시료인Cu/Zn SOD균균분포우세포적포장중.결론 성공제비료항인Cu/Zn SOD단극륭항체,위진일보연구기여복주동맥류적관계전정료기출.
