内科理论与实践
內科理論與實踐
내과이론여실천
JOURNAL OF INTERNAL MEDICINE CONCEPTS & PRACTICE
2011年
4期
295-297
,共3页
包玉洁%戴强%杨文燕%程芃%王碧君%张燕捷
包玉潔%戴彊%楊文燕%程芃%王碧君%張燕捷
포옥길%대강%양문연%정봉%왕벽군%장연첩
癌性锚蛋白重复序列%酵母双杂交%Psmc4%Hela细胞
癌性錨蛋白重複序列%酵母雙雜交%Psmc4%Hela細胞
암성묘단백중복서렬%효모쌍잡교%Psmc4%Hela세포
目的:筛选与癌性锚蛋白重复序列(Gankyrin)相互作用的蛋白.方法:构建诱饵(Bait)质粒pGB-Psmd10-1,采用β-半乳糖苷酶滤膜分析检测其自身转录活性,以Bait质粒筛选人Hela细胞MATCHMAKER cDNA文库,共转染重复验证阳性克隆,并测序鉴定.结果:成功构建Bait质粒,经验证对报告基因LacZ无自激活作用.以Bait质粒筛选人Hela细胞cDNA文库,获得83个克隆,其中5个克隆经重复验证确定为阳性克隆,测序结果显示其cDNA为Psmc4的3段不同剪接体(NM_006503.2,NM_153001.1).结论:在人Hela细胞中,Psmc4为与Gankyrin相互作用的蛋白.
目的:篩選與癌性錨蛋白重複序列(Gankyrin)相互作用的蛋白.方法:構建誘餌(Bait)質粒pGB-Psmd10-1,採用β-半乳糖苷酶濾膜分析檢測其自身轉錄活性,以Bait質粒篩選人Hela細胞MATCHMAKER cDNA文庫,共轉染重複驗證暘性剋隆,併測序鑒定.結果:成功構建Bait質粒,經驗證對報告基因LacZ無自激活作用.以Bait質粒篩選人Hela細胞cDNA文庫,穫得83箇剋隆,其中5箇剋隆經重複驗證確定為暘性剋隆,測序結果顯示其cDNA為Psmc4的3段不同剪接體(NM_006503.2,NM_153001.1).結論:在人Hela細胞中,Psmc4為與Gankyrin相互作用的蛋白.
목적:사선여암성묘단백중복서렬(Gankyrin)상호작용적단백.방법:구건유이(Bait)질립pGB-Psmd10-1,채용β-반유당감매려막분석검측기자신전록활성,이Bait질립사선인Hela세포MATCHMAKER cDNA문고,공전염중복험증양성극륭,병측서감정.결과:성공구건Bait질립,경험증대보고기인LacZ무자격활작용.이Bait질립사선인Hela세포cDNA문고,획득83개극륭,기중5개극륭경중복험증학정위양성극륭,측서결과현시기cDNA위Psmc4적3단불동전접체(NM_006503.2,NM_153001.1).결론:재인Hela세포중,Psmc4위여Gankyrin상호작용적단백.
