滨州医学院学报
濱州醫學院學報
빈주의학원학보
JOURNAL OF BINZHOU MEDICAL COLLEGE
2012年
2期
113-116
,共4页
siRNA%VEGF-C%Survivin%乳腺癌%凋亡
siRNA%VEGF-C%Survivin%乳腺癌%凋亡
siRNA%VEGF-C%Survivin%유선암%조망
目的 体外观察siRNA靶向干扰VEGF-C基因对4T1小鼠乳腺癌细胞的生物学行为影响.方法 选用HifectinII真核转染试剂将化学修饰的针对小鼠VEGF-C基因的siRNA转染4T1小鼠乳腺癌细胞株,设立空白对照组(只加培养基),脂质体组(每孔加培养基与0.5 μL Hifectin II 真核转染试剂),SCR组(100 nM),siRNA组(100 nM).蛋白印迹试验检测转染前后细胞中VEGF-C的蛋白水平表达的变化;半定量RT-PCR检测VEGF-C、Survivin、BCL-2、BAX的mRNA水平表达的变化; MTT比色法检测细胞的增殖;Transwell小室方法检测肿瘤细胞的侵袭性改变;Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡.结果 转染VEGF-C siRNA 48 h后4T1细胞的VEGF-C基因的mRNA和蛋白水平表达明显降低,空白对照组、脂质体组和siRNA SCR组各指标差异无显著性(P＞0.05);4T1细胞生长受到抑制,Transwell小室方法检测肿瘤细胞的侵袭性降低,Hoechst 33258荧光染色显示细胞内可见凋亡小体.结论 化学修饰siRNA介导的RNA干扰能下调靶基因VEGF-C的表达并能够促进4T1细胞的凋亡,抑制4T1细胞的增殖与侵袭性.
目的 體外觀察siRNA靶嚮榦擾VEGF-C基因對4T1小鼠乳腺癌細胞的生物學行為影響.方法 選用HifectinII真覈轉染試劑將化學脩飾的針對小鼠VEGF-C基因的siRNA轉染4T1小鼠乳腺癌細胞株,設立空白對照組(隻加培養基),脂質體組(每孔加培養基與0.5 μL Hifectin II 真覈轉染試劑),SCR組(100 nM),siRNA組(100 nM).蛋白印跡試驗檢測轉染前後細胞中VEGF-C的蛋白水平錶達的變化;半定量RT-PCR檢測VEGF-C、Survivin、BCL-2、BAX的mRNA水平錶達的變化; MTT比色法檢測細胞的增殖;Transwell小室方法檢測腫瘤細胞的侵襲性改變;Hochest33258熒光染色觀察細胞凋亡.結果 轉染VEGF-C siRNA 48 h後4T1細胞的VEGF-C基因的mRNA和蛋白水平錶達明顯降低,空白對照組、脂質體組和siRNA SCR組各指標差異無顯著性(P＞0.05);4T1細胞生長受到抑製,Transwell小室方法檢測腫瘤細胞的侵襲性降低,Hoechst 33258熒光染色顯示細胞內可見凋亡小體.結論 化學脩飾siRNA介導的RNA榦擾能下調靶基因VEGF-C的錶達併能夠促進4T1細胞的凋亡,抑製4T1細胞的增殖與侵襲性.
목적 체외관찰siRNA파향간우VEGF-C기인대4T1소서유선암세포적생물학행위영향.방법 선용HifectinII진핵전염시제장화학수식적침대소서VEGF-C기인적siRNA전염4T1소서유선암세포주,설립공백대조조(지가배양기),지질체조(매공가배양기여0.5 μL Hifectin II 진핵전염시제),SCR조(100 nM),siRNA조(100 nM).단백인적시험검측전염전후세포중VEGF-C적단백수평표체적변화;반정량RT-PCR검측VEGF-C、Survivin、BCL-2、BAX적mRNA수평표체적변화; MTT비색법검측세포적증식;Transwell소실방법검측종류세포적침습성개변;Hochest33258형광염색관찰세포조망.결과 전염VEGF-C siRNA 48 h후4T1세포적VEGF-C기인적mRNA화단백수평표체명현강저,공백대조조、지질체조화siRNA SCR조각지표차이무현저성(P＞0.05);4T1세포생장수도억제,Transwell소실방법검측종류세포적침습성강저,Hoechst 33258형광염색현시세포내가견조망소체.결론 화학수식siRNA개도적RNA간우능하조파기인VEGF-C적표체병능구촉진4T1세포적조망,억제4T1세포적증식여침습성.
