医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2012年
3期
54-57
,共4页
王晔恺%周吉航%周世权%曾芳%黄燕燕%刘晓光
王曄愷%週吉航%週世權%曾芳%黃燕燕%劉曉光
왕엽개%주길항%주세권%증방%황연연%류효광
单细胞分选%单细胞反转录聚合酶链反应%乙肝表面抗体%亲和力
單細胞分選%單細胞反轉錄聚閤酶鏈反應%乙肝錶麵抗體%親和力
단세포분선%단세포반전록취합매련반응%을간표면항체%친화력
目的 建立一种利用单细胞分选技术克隆人源化乙肝表面抗体重链的方法.方法 从乙肝疫苗接种志愿者外周血中分选得到单个抗体分泌细胞,单细胞RT - PCR筛选20个单菌落,挑选其中有IgG保守区域的克隆全长,并将IgG(H)基因全长克隆到pEGFP -N1载体,转染COS -7细胞,取上清液进行Western blotting验证,并采用Batty饱和法测定亲和力常数.结果 筛选得到IgG(H)能与HBsAg结合,且Ka值达到2.39×109L/mol.结论 利用单细胞分选克隆技术获得的抗体重链亲和力较高.
目的 建立一種利用單細胞分選技術剋隆人源化乙肝錶麵抗體重鏈的方法.方法 從乙肝疫苗接種誌願者外週血中分選得到單箇抗體分泌細胞,單細胞RT - PCR篩選20箇單菌落,挑選其中有IgG保守區域的剋隆全長,併將IgG(H)基因全長剋隆到pEGFP -N1載體,轉染COS -7細胞,取上清液進行Western blotting驗證,併採用Batty飽和法測定親和力常數.結果 篩選得到IgG(H)能與HBsAg結閤,且Ka值達到2.39×109L/mol.結論 利用單細胞分選剋隆技術穫得的抗體重鏈親和力較高.
목적 건립일충이용단세포분선기술극륭인원화을간표면항체중련적방법.방법 종을간역묘접충지원자외주혈중분선득도단개항체분비세포,단세포RT - PCR사선20개단균락,도선기중유IgG보수구역적극륭전장,병장IgG(H)기인전장극륭도pEGFP -N1재체,전염COS -7세포,취상청액진행Western blotting험증,병채용Batty포화법측정친화력상수.결과 사선득도IgG(H)능여HBsAg결합,차Ka치체도2.39×109L/mol.결론 이용단세포분선극륭기술획득적항체중련친화력교고.
