中国食品学报
中國食品學報
중국식품학보
JOURNAL OF CHINESE INSTITUTE OF FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
2012年
4期
175-181
,共7页
张红娟%李素芳%李白%孙骏威%徐伟
張紅娟%李素芳%李白%孫駿威%徐偉
장홍연%리소방%리백%손준위%서위
蜂产品%单核细胞增生李斯特菌%检测%双重PCR%荧光定量PCR
蜂產品%單覈細胞增生李斯特菌%檢測%雙重PCR%熒光定量PCR
봉산품%단핵세포증생리사특균%검측%쌍중PCR%형광정량PCR
目的:为了保障蜂产品免受致病性单核细胞增生李斯特菌的威胁,对蜂产品中单核细胞增生李斯特菌进行检测.方法:采用培养和分子生物学的检测方法研究蜂产品中致病性单核细胞增生李斯特菌的污染状况.将高浓度的病原菌人工污染到蜂蜜和蜂王浆中,室温存放一定时间后,在选择性培养基上增菌培养；以毒力基因hly和16 s RNA基因为靶序列,建立双重PCR检测病原菌的方法；以5’、3’端标记FAM、TAMRA的hly基因探针进行荧光定量PCR检测.结果:单增李斯特菌在蜂蜜中的存活时间为5d,而在蜂王浆中不能存活.对未经增菌的人工污染蜂产品采用溶菌酶+蛋白酶K的方法提取DNA,同时采用本实验中建立的双重PCR和荧光定量PCR方法检测.蜂蜜中单增李斯特菌含量均为102 CFU/mL.采用这两种方法可在8h内完成蜂蜜中单核细胞增生李斯特菌的快速检测.结论:单增李斯特菌能够在蜂蜜中存活数天,几乎不继续繁殖,而在蜂王浆中不能存活.
目的:為瞭保障蜂產品免受緻病性單覈細胞增生李斯特菌的威脅,對蜂產品中單覈細胞增生李斯特菌進行檢測.方法:採用培養和分子生物學的檢測方法研究蜂產品中緻病性單覈細胞增生李斯特菌的汙染狀況.將高濃度的病原菌人工汙染到蜂蜜和蜂王漿中,室溫存放一定時間後,在選擇性培養基上增菌培養；以毒力基因hly和16 s RNA基因為靶序列,建立雙重PCR檢測病原菌的方法；以5’、3’耑標記FAM、TAMRA的hly基因探針進行熒光定量PCR檢測.結果:單增李斯特菌在蜂蜜中的存活時間為5d,而在蜂王漿中不能存活.對未經增菌的人工汙染蜂產品採用溶菌酶+蛋白酶K的方法提取DNA,同時採用本實驗中建立的雙重PCR和熒光定量PCR方法檢測.蜂蜜中單增李斯特菌含量均為102 CFU/mL.採用這兩種方法可在8h內完成蜂蜜中單覈細胞增生李斯特菌的快速檢測.結論:單增李斯特菌能夠在蜂蜜中存活數天,幾乎不繼續繁殖,而在蜂王漿中不能存活.
목적:위료보장봉산품면수치병성단핵세포증생리사특균적위협,대봉산품중단핵세포증생리사특균진행검측.방법:채용배양화분자생물학적검측방법연구봉산품중치병성단핵세포증생리사특균적오염상황.장고농도적병원균인공오염도봉밀화봉왕장중,실온존방일정시간후,재선택성배양기상증균배양；이독력기인hly화16 s RNA기인위파서렬,건립쌍중PCR검측병원균적방법；이5’、3’단표기FAM、TAMRA적hly기인탐침진행형광정량PCR검측.결과:단증리사특균재봉밀중적존활시간위5d,이재봉왕장중불능존활.대미경증균적인공오염봉산품채용용균매+단백매K적방법제취DNA,동시채용본실험중건립적쌍중PCR화형광정량PCR방법검측.봉밀중단증리사특균함량균위102 CFU/mL.채용저량충방법가재8h내완성봉밀중단핵세포증생리사특균적쾌속검측.결론:단증리사특균능구재봉밀중존활수천,궤호불계속번식,이재봉왕장중불능존활.
