中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2005年
2期
89-92
,共4页
郑丽舒%衣作安%李武平%张成海%王刚%侯云德
鄭麗舒%衣作安%李武平%張成海%王剛%侯雲德
정려서%의작안%리무평%장성해%왕강%후운덕
幽门螺杆菌%粘附素基因%克隆%表达
幽門螺桿菌%粘附素基因%剋隆%錶達
유문라간균%점부소기인%극륭%표체
目的克隆幽门螺杆菌粘附素基因hpaA,构建其原核表达系统并鉴定融合蛋白免疫原性.方法采用PCR技术从幽门螺杆菌总DNA中扩增hpaA基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET30a的HpaA表达载体,在E.coliBL21DE3宿主菌中用IPTG诱导表达,Ni2+柱纯化后经Western blot鉴定其免疫原性.结果所克隆的hpaA基因与报道的相应核苷酸序列同源性为94.8%～97.3%,氨基酸序列同源性为94.6%～97.7%,在134～139位存在一段KRTIQK结构,HpaA融合蛋白在pET30a载体中可高效表达,经纯化后可获得高纯度的重组蛋白.结论成功构建HpaA原核表达系统,所表达的融合蛋白具有较好的免疫原性,可作为Hp疫苗的候选抗原.
目的剋隆幽門螺桿菌粘附素基因hpaA,構建其原覈錶達繫統併鑒定融閤蛋白免疫原性.方法採用PCR技術從幽門螺桿菌總DNA中擴增hpaA基因,T-A剋隆後測定覈苷痠序列,構建pET30a的HpaA錶達載體,在E.coliBL21DE3宿主菌中用IPTG誘導錶達,Ni2+柱純化後經Western blot鑒定其免疫原性.結果所剋隆的hpaA基因與報道的相應覈苷痠序列同源性為94.8%～97.3%,氨基痠序列同源性為94.6%～97.7%,在134～139位存在一段KRTIQK結構,HpaA融閤蛋白在pET30a載體中可高效錶達,經純化後可穫得高純度的重組蛋白.結論成功構建HpaA原覈錶達繫統,所錶達的融閤蛋白具有較好的免疫原性,可作為Hp疫苗的候選抗原.
목적극륭유문라간균점부소기인hpaA,구건기원핵표체계통병감정융합단백면역원성.방법채용PCR기술종유문라간균총DNA중확증hpaA기인,T-A극륭후측정핵감산서렬,구건pET30a적HpaA표체재체,재E.coliBL21DE3숙주균중용IPTG유도표체,Ni2+주순화후경Western blot감정기면역원성.결과소극륭적hpaA기인여보도적상응핵감산서렬동원성위94.8%～97.3%,안기산서렬동원성위94.6%～97.7%,재134～139위존재일단KRTIQK결구,HpaA융합단백재pET30a재체중가고효표체,경순화후가획득고순도적중조단백.결론성공구건HpaA원핵표체계통,소표체적융합단백구유교호적면역원성,가작위Hp역묘적후선항원.
