首都医科大学学报
首都醫科大學學報
수도의과대학학보
JOURNAL OF CAPITAL UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2008年
2期
153-157
,共5页
张雷%王军锋%葛瑞良%王晓民
張雷%王軍鋒%葛瑞良%王曉民
장뢰%왕군봉%갈서량%왕효민
帕金森病%1甲基4苯基吡啶离子%经典瞬间受体电位通道蛋白%神经保护
帕金森病%1甲基4苯基吡啶離子%經典瞬間受體電位通道蛋白%神經保護
파금삼병%1갑기4분기필정리자%경전순간수체전위통도단백%신경보호
目的 探讨经典瞬间受体电位通道蛋白(transient receptor potential canonical channel,TRPC)家族在1甲基4苯基吡啶离子(1 Methyl 4 phenylpyridinium ion,MPP+)导致的MN9D细胞毒性损伤中的作用.方法 用不同浓度(62.5、125、250、500、1 000 μmol/L)的MPP+处理MN9D细胞24 h,500 μmol/L MPP+处理MN9D细胞不同时间(3、6、12、24、36 h),建立细胞损伤模型.用RT PCR的方法检测MN9D细胞中内源性TRPC的表达情况;500 μmol/L MPP+作用于MN9D细胞,以Western blot法检测MN9D细胞内源性TRPC表达的变化;构建GFP与TRPC3 GFP腺病毒载体,转染到MN9D细胞中,以四甲基偶氮唑盐比色法(methods the tetrazolium,MTT)的方法检测过表达的TRPC3对MPP+引起的MN9D细胞损伤的保护作用.结果 500 μmol/L MPP+处理MN9D细胞6h就可以显著降低细胞内TRPC3蛋白水平的表达,但对TRPC6的表达无影响.过表达TRPC3能够保护MN9D细胞免受MPP+的毒性损伤.结论 MPP+特异性地降低MN9D细胞TRPC3蛋白水平,过表达TRPC3可以抑制MPP+引起的MN9D细胞损伤.这种现象提示TRPC3通道可能参与了帕金森病发病的分子机制.
目的 探討經典瞬間受體電位通道蛋白(transient receptor potential canonical channel,TRPC)傢族在1甲基4苯基吡啶離子(1 Methyl 4 phenylpyridinium ion,MPP+)導緻的MN9D細胞毒性損傷中的作用.方法 用不同濃度(62.5、125、250、500、1 000 μmol/L)的MPP+處理MN9D細胞24 h,500 μmol/L MPP+處理MN9D細胞不同時間(3、6、12、24、36 h),建立細胞損傷模型.用RT PCR的方法檢測MN9D細胞中內源性TRPC的錶達情況;500 μmol/L MPP+作用于MN9D細胞,以Western blot法檢測MN9D細胞內源性TRPC錶達的變化;構建GFP與TRPC3 GFP腺病毒載體,轉染到MN9D細胞中,以四甲基偶氮唑鹽比色法(methods the tetrazolium,MTT)的方法檢測過錶達的TRPC3對MPP+引起的MN9D細胞損傷的保護作用.結果 500 μmol/L MPP+處理MN9D細胞6h就可以顯著降低細胞內TRPC3蛋白水平的錶達,但對TRPC6的錶達無影響.過錶達TRPC3能夠保護MN9D細胞免受MPP+的毒性損傷.結論 MPP+特異性地降低MN9D細胞TRPC3蛋白水平,過錶達TRPC3可以抑製MPP+引起的MN9D細胞損傷.這種現象提示TRPC3通道可能參與瞭帕金森病髮病的分子機製.
목적 탐토경전순간수체전위통도단백(transient receptor potential canonical channel,TRPC)가족재1갑기4분기필정리자(1 Methyl 4 phenylpyridinium ion,MPP+)도치적MN9D세포독성손상중적작용.방법 용불동농도(62.5、125、250、500、1 000 μmol/L)적MPP+처리MN9D세포24 h,500 μmol/L MPP+처리MN9D세포불동시간(3、6、12、24、36 h),건립세포손상모형.용RT PCR적방법검측MN9D세포중내원성TRPC적표체정황;500 μmol/L MPP+작용우MN9D세포,이Western blot법검측MN9D세포내원성TRPC표체적변화;구건GFP여TRPC3 GFP선병독재체,전염도MN9D세포중,이사갑기우담서염비색법(methods the tetrazolium,MTT)적방법검측과표체적TRPC3대MPP+인기적MN9D세포손상적보호작용.결과 500 μmol/L MPP+처리MN9D세포6h취가이현저강저세포내TRPC3단백수평적표체,단대TRPC6적표체무영향.과표체TRPC3능구보호MN9D세포면수MPP+적독성손상.결론 MPP+특이성지강저MN9D세포TRPC3단백수평,과표체TRPC3가이억제MPP+인기적MN9D세포손상.저충현상제시TRPC3통도가능삼여료파금삼병발병적분자궤제.
