云南农业大学学报
雲南農業大學學報
운남농업대학학보
JOURNAL OF YUNNAN AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
3期
295-301
,共7页
林良斌%马占强%张传利%刘雅婷%毛孝强%厦国银%马忠琴
林良斌%馬佔彊%張傳利%劉雅婷%毛孝彊%廈國銀%馬忠琴
림량빈%마점강%장전리%류아정%모효강%하국은%마충금
甘蓝型油菜%紫罗兰%原生质体%体细胞杂交%植株再生
甘藍型油菜%紫囉蘭%原生質體%體細胞雜交%植株再生
감람형유채%자라란%원생질체%체세포잡교%식주재생
以甘蓝型油菜湘油15号和紫罗兰的下胚轴为材料,分离制备原生质体.采用PEG-高Ca2+-高pH法进行原生质体融合,在PEG浓度为30%,原生质体融合密度为5.0×105个/mL下融合25 min,融合率可达17%.在附加1.5 mg/L 2,4-D,0.5 mg/L NAA,0.5 mL/L BA的改良的KM8p培养基中.以0.3 mol/L蔗糖和0.1 mol/L葡萄糖作渗透稳定剂进行液体浅层培养融合体,培养3～6 d细胞发生第1次分裂,7 d时统计分裂频率最高为13.8%,35 d后形成大量的细胞团和肉眼可见的小愈伤组织,其植板率最高为6.5%.然后转移到含有0.1 mg/L2,4-D和0.2 mg/L BA的MS固体培养基上使其增殖.当愈伤组织长至5 mm左右时,将其转到含有0.5 mg/LBA,0.1 mg/L NAA和0.2 mg/L GA3的MS分化培养基上诱导芽分化.当芽长1～2 cm时,将其切下插入附加0.5 mg/L IBA的1/2 MS生根培养基上,两周后即可获得完整植株.细胞学鉴定表明获得了杂种植株.
以甘藍型油菜湘油15號和紫囉蘭的下胚軸為材料,分離製備原生質體.採用PEG-高Ca2+-高pH法進行原生質體融閤,在PEG濃度為30%,原生質體融閤密度為5.0×105箇/mL下融閤25 min,融閤率可達17%.在附加1.5 mg/L 2,4-D,0.5 mg/L NAA,0.5 mL/L BA的改良的KM8p培養基中.以0.3 mol/L蔗糖和0.1 mol/L葡萄糖作滲透穩定劑進行液體淺層培養融閤體,培養3～6 d細胞髮生第1次分裂,7 d時統計分裂頻率最高為13.8%,35 d後形成大量的細胞糰和肉眼可見的小愈傷組織,其植闆率最高為6.5%.然後轉移到含有0.1 mg/L2,4-D和0.2 mg/L BA的MS固體培養基上使其增殖.噹愈傷組織長至5 mm左右時,將其轉到含有0.5 mg/LBA,0.1 mg/L NAA和0.2 mg/L GA3的MS分化培養基上誘導芽分化.噹芽長1～2 cm時,將其切下插入附加0.5 mg/L IBA的1/2 MS生根培養基上,兩週後即可穫得完整植株.細胞學鑒定錶明穫得瞭雜種植株.
이감람형유채상유15호화자라란적하배축위재료,분리제비원생질체.채용PEG-고Ca2+-고pH법진행원생질체융합,재PEG농도위30%,원생질체융합밀도위5.0×105개/mL하융합25 min,융합솔가체17%.재부가1.5 mg/L 2,4-D,0.5 mg/L NAA,0.5 mL/L BA적개량적KM8p배양기중.이0.3 mol/L자당화0.1 mol/L포도당작삼투은정제진행액체천층배양융합체,배양3～6 d세포발생제1차분렬,7 d시통계분렬빈솔최고위13.8%,35 d후형성대량적세포단화육안가견적소유상조직,기식판솔최고위6.5%.연후전이도함유0.1 mg/L2,4-D화0.2 mg/L BA적MS고체배양기상사기증식.당유상조직장지5 mm좌우시,장기전도함유0.5 mg/LBA,0.1 mg/L NAA화0.2 mg/L GA3적MS분화배양기상유도아분화.당아장1～2 cm시,장기절하삽입부가0.5 mg/L IBA적1/2 MS생근배양기상,량주후즉가획득완정식주.세포학감정표명획득료잡충식주.
