大连医科大学学报
大連醫科大學學報
대련의과대학학보
JOURNAL OF DALIAN MEDICAL UNIVERSITY
2008年
5期
483-486
,共4页
许玲%姜涛%张翠丽%臧师竹%辛毅
許玲%薑濤%張翠麗%臧師竹%辛毅
허령%강도%장취려%장사죽%신의
心肌蛋白%栽体两性电解质%双向凝胶电泳
心肌蛋白%栽體兩性電解質%雙嚮凝膠電泳
심기단백%재체량성전해질%쌍향응효전영
[目的]建立大鼠能源心肌蛋白质组研究的双向凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技术.[方法]提取SD大鼠心肌总蛋白,以载体两性电解质pH梯度等电聚焦为第一向电泳,垂直SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向电泳,完成2-DE,考马斯亮蓝染色后扫描获取凝胶图像并用PDQuest软件进行分析.对2-DE中关键环节,如调节pH 3～10和pH 4～6栽体两性电解质的比例、样品离心处理、增加等电聚焦电压和离子强度等方面进行优化.[结果]通过样品处理后离心除去多糖成分,pH 3～10和pH 4～6载体两性电解质的比例调至1:2,改变电泳条件,成功消除横向拖尾、分辨率较高的心肌蛋白双向电泳图谱.每张图谱可检测到超过150个蛋白质点,匹配率大于55%.[结论]建立了SD大鼠心肌蛋白的双向凝胶电泳分析技术,该方法可行、重复性好,所提供的方案具有一定参考意义.
[目的]建立大鼠能源心肌蛋白質組研究的雙嚮凝膠電泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)技術.[方法]提取SD大鼠心肌總蛋白,以載體兩性電解質pH梯度等電聚焦為第一嚮電泳,垂直SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳為第二嚮電泳,完成2-DE,攷馬斯亮藍染色後掃描穫取凝膠圖像併用PDQuest軟件進行分析.對2-DE中關鍵環節,如調節pH 3～10和pH 4～6栽體兩性電解質的比例、樣品離心處理、增加等電聚焦電壓和離子彊度等方麵進行優化.[結果]通過樣品處理後離心除去多糖成分,pH 3～10和pH 4～6載體兩性電解質的比例調至1:2,改變電泳條件,成功消除橫嚮拖尾、分辨率較高的心肌蛋白雙嚮電泳圖譜.每張圖譜可檢測到超過150箇蛋白質點,匹配率大于55%.[結論]建立瞭SD大鼠心肌蛋白的雙嚮凝膠電泳分析技術,該方法可行、重複性好,所提供的方案具有一定參攷意義.
[목적]건립대서능원심기단백질조연구적쌍향응효전영(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)기술.[방법]제취SD대서심기총단백,이재체량성전해질pH제도등전취초위제일향전영,수직SDS-취병희선알응효전영위제이향전영,완성2-DE,고마사량람염색후소묘획취응효도상병용PDQuest연건진행분석.대2-DE중관건배절,여조절pH 3～10화pH 4～6재체량성전해질적비례、양품리심처리、증가등전취초전압화리자강도등방면진행우화.[결과]통과양품처리후리심제거다당성분,pH 3～10화pH 4～6재체량성전해질적비례조지1:2,개변전영조건,성공소제횡향타미、분변솔교고적심기단백쌍향전영도보.매장도보가검측도초과150개단백질점,필배솔대우55%.[결론]건립료SD대서심기단백적쌍향응효전영분석기술,해방법가행、중복성호,소제공적방안구유일정삼고의의.
