北方园艺
北方園藝
북방완예
NORTHERN HORTICULTURE
2010年
12期
135-137
,共3页
黄瓜花叶病毒%外壳蛋白基因%双元载体%载体构建
黃瓜花葉病毒%外殼蛋白基因%雙元載體%載體構建
황과화협병독%외각단백기인%쌍원재체%재체구건
以黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因为目的基因,以大肠杆菌DH5α为表达载体体外操作寄主菌,农杆菌LBA4404为最终双元载体寄主菌.将RT-PCR获得的目的基因片段连接到pMD18-T simple Vectoer上,冻融法转化到大肠杆菌扩繁后,经限制性核酸内切酶酶切插入表达载体适宜酶切位点上,重组质粒DNA经冻融法转化到只含辅助质粒的根癌农杆菌中得到工程菌,完成含目的基因的双元载体构建,为培育抗CMV病毒的番茄品种打下基础.
以黃瓜花葉病毒外殼蛋白基因為目的基因,以大腸桿菌DH5α為錶達載體體外操作寄主菌,農桿菌LBA4404為最終雙元載體寄主菌.將RT-PCR穫得的目的基因片段連接到pMD18-T simple Vectoer上,凍融法轉化到大腸桿菌擴繁後,經限製性覈痠內切酶酶切插入錶達載體適宜酶切位點上,重組質粒DNA經凍融法轉化到隻含輔助質粒的根癌農桿菌中得到工程菌,完成含目的基因的雙元載體構建,為培育抗CMV病毒的番茄品種打下基礎.
이황과화협병독외각단백기인위목적기인,이대장간균DH5α위표체재체체외조작기주균,농간균LBA4404위최종쌍원재체기주균.장RT-PCR획득적목적기인편단련접도pMD18-T simple Vectoer상,동융법전화도대장간균확번후,경한제성핵산내절매매절삽입표체재체괄의매절위점상,중조질립DNA경동융법전화도지함보조질립적근암농간균중득도공정균,완성함목적기인적쌍원재체구건,위배육항CMV병독적번가품충타하기출.