医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2011年
1期
7-10
,共4页
蛋白-蛋白相互作用%TRB3%SIAH1%泛素-蛋白酶体途径
蛋白-蛋白相互作用%TRB3%SIAH1%汎素-蛋白酶體途徑
단백-단백상호작용%TRB3%SIAH1%범소-단백매체도경
目的 利用酵母回转实验和免疫共沉淀实验验证SIAH1和TRB3之间的相互作用并探讨其功能相关性..方法 将全长形式的TRB3基因和SIAH1基因分别克隆入酵母表达载体pDBLeu和pPC86中,共转化至MaV203酵母感受态细胞,验证其相互作用,然后分别构建至真核表达载体pCMV-Myc和pFLAG-CMV-2中,采用免疫共沉淀实验进行进一步验证.通过体内泛素化实验检测SIAH1对TRB3蛋白稳定性及泛素化修饰的影响.结果 通过在酵母细胞中的回转实验和HEK293T 细胞中的免疫共沉淀实验证实了TRB3 与SIAH1 之间的相互作用.通过体内泛素化实验证实了SIAH1介导了TRB3的泛素化修饰和降解.结论 证实了TRB3与SIAH1之间的相互作用并发现SIAH1介导了TRB3的泛素化修饰和降解,为TRB3蛋白的功能研究提供了新的线索.
目的 利用酵母迴轉實驗和免疫共沉澱實驗驗證SIAH1和TRB3之間的相互作用併探討其功能相關性..方法 將全長形式的TRB3基因和SIAH1基因分彆剋隆入酵母錶達載體pDBLeu和pPC86中,共轉化至MaV203酵母感受態細胞,驗證其相互作用,然後分彆構建至真覈錶達載體pCMV-Myc和pFLAG-CMV-2中,採用免疫共沉澱實驗進行進一步驗證.通過體內汎素化實驗檢測SIAH1對TRB3蛋白穩定性及汎素化脩飾的影響.結果 通過在酵母細胞中的迴轉實驗和HEK293T 細胞中的免疫共沉澱實驗證實瞭TRB3 與SIAH1 之間的相互作用.通過體內汎素化實驗證實瞭SIAH1介導瞭TRB3的汎素化脩飾和降解.結論 證實瞭TRB3與SIAH1之間的相互作用併髮現SIAH1介導瞭TRB3的汎素化脩飾和降解,為TRB3蛋白的功能研究提供瞭新的線索.
목적 이용효모회전실험화면역공침정실험험증SIAH1화TRB3지간적상호작용병탐토기공능상관성..방법 장전장형식적TRB3기인화SIAH1기인분별극륭입효모표체재체pDBLeu화pPC86중,공전화지MaV203효모감수태세포,험증기상호작용,연후분별구건지진핵표체재체pCMV-Myc화pFLAG-CMV-2중,채용면역공침정실험진행진일보험증.통과체내범소화실험검측SIAH1대TRB3단백은정성급범소화수식적영향.결과 통과재효모세포중적회전실험화HEK293T 세포중적면역공침정실험증실료TRB3 여SIAH1 지간적상호작용.통과체내범소화실험증실료SIAH1개도료TRB3적범소화수식화강해.결론 증실료TRB3여SIAH1지간적상호작용병발현SIAH1개도료TRB3적범소화수식화강해,위TRB3단백적공능연구제공료신적선색.
