厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2011年
1期
93-96
,共4页
钟丽娟%Bwegendaho Damien%陈龙军%凌雪萍%何宁%卢英华
鐘麗娟%Bwegendaho Damien%陳龍軍%凌雪萍%何寧%盧英華
종려연%Bwegendaho Damien%진룡군%릉설평%하저%로영화
α-1,6-葡聚糖酶%朱黄青霉%毕赤酵母
α-1,6-葡聚糖酶%硃黃青黴%畢赤酵母
α-1,6-포취당매%주황청매%필적효모
根据朱黄青霉(Penicillium minioluteum HI-4)α-1,6-葡聚糖酶的基因序列,人工合成α-1,6-葡聚糖酶基因并将其插入毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZαA,PCR和双酶切验证结果均表明成功构建了重组质粒pPICZαA-Dex.重组质粒经SacⅠ线性化后整合到毕赤酵母X33基因组中进行表达.摇瓶发酵表明,重组毕赤酵母经甲醇诱导120 h产酶活力达到最高值29.2 U/ mL,SDS-PAGE结果显示在67 ku附近有明显的条带,与α-1,6-葡聚糖酶理论分子质量相符合.
根據硃黃青黴(Penicillium minioluteum HI-4)α-1,6-葡聚糖酶的基因序列,人工閤成α-1,6-葡聚糖酶基因併將其插入畢赤酵母(Pichia pastoris)錶達載體pPICZαA,PCR和雙酶切驗證結果均錶明成功構建瞭重組質粒pPICZαA-Dex.重組質粒經SacⅠ線性化後整閤到畢赤酵母X33基因組中進行錶達.搖瓶髮酵錶明,重組畢赤酵母經甲醇誘導120 h產酶活力達到最高值29.2 U/ mL,SDS-PAGE結果顯示在67 ku附近有明顯的條帶,與α-1,6-葡聚糖酶理論分子質量相符閤.
근거주황청매(Penicillium minioluteum HI-4)α-1,6-포취당매적기인서렬,인공합성α-1,6-포취당매기인병장기삽입필적효모(Pichia pastoris)표체재체pPICZαA,PCR화쌍매절험증결과균표명성공구건료중조질립pPICZαA-Dex.중조질립경SacⅠ선성화후정합도필적효모X33기인조중진행표체.요병발효표명,중조필적효모경갑순유도120 h산매활력체도최고치29.2 U/ mL,SDS-PAGE결과현시재67 ku부근유명현적조대,여α-1,6-포취당매이론분자질량상부합.
