中国现代普通外科进展
中國現代普通外科進展
중국현대보통외과진전
CHINESE JOURNAL OF CURRENT ADVANCES IN GENERAL SURGERY
2011年
2期
94-98
,共5页
王人颢%万美荣%李德强%刘小云
王人顥%萬美榮%李德彊%劉小雲
왕인호%만미영%리덕강%류소운
骨髓间充质干细胞%肝细胞生长因子%表皮生长因子%成纤维生长因子%诱导%肝细胞
骨髓間充質榦細胞%肝細胞生長因子%錶皮生長因子%成纖維生長因子%誘導%肝細胞
골수간충질간세포%간세포생장인자%표피생장인자%성섬유생장인자%유도%간세포
目的:探索骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向肝细胞诱导的最有效方法,并对诱导后的细胞进行鉴定.方法:取健康成人的适量骨髓,采用梯度密度离心法分离BM-MSCs并行贴壁培养,扩增至第3代,取第3代细胞分3组分别进行诱导.A组:肝细胞生长因子(HGF)+表皮生长因子(EGF);B组:肝细胞生长因子(HGF)+成纤维生长因子(FGF);C组:肝细胞生长因子(HGF)+表皮生长因子(HGF)+成纤维生长因子(HGF).分别进行倍养,诱导前通过流式细胞仪分析细胞表面标志CD44、CD90的表达率对倍养的BM-MSCs进行鉴定,诱导后通过RT-PCR、免疫组织化学法、糖原染色检测鉴定其诱导分化倩况.结果:本文通过建立从人骨髓中分离、倍养、扩增、传代、纯化BM-MSCs,定向诱导分化,使其成功向肝样细胞转化,图像分析表明C组鼠抗人白蛋白单克隆抗体(ALB)表达最为明显.结论:证明3种组合均可成功将骨髓间充质干细胞向肝样细胞诱导分化,均能分泌肝细胞特异性标记如鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体(AFP)、ALB、糖原,其中C组效果最为突出.
目的:探索骨髓間充質榦細胞(BM-MSCs)嚮肝細胞誘導的最有效方法,併對誘導後的細胞進行鑒定.方法:取健康成人的適量骨髓,採用梯度密度離心法分離BM-MSCs併行貼壁培養,擴增至第3代,取第3代細胞分3組分彆進行誘導.A組:肝細胞生長因子(HGF)+錶皮生長因子(EGF);B組:肝細胞生長因子(HGF)+成纖維生長因子(FGF);C組:肝細胞生長因子(HGF)+錶皮生長因子(HGF)+成纖維生長因子(HGF).分彆進行倍養,誘導前通過流式細胞儀分析細胞錶麵標誌CD44、CD90的錶達率對倍養的BM-MSCs進行鑒定,誘導後通過RT-PCR、免疫組織化學法、糖原染色檢測鑒定其誘導分化倩況.結果:本文通過建立從人骨髓中分離、倍養、擴增、傳代、純化BM-MSCs,定嚮誘導分化,使其成功嚮肝樣細胞轉化,圖像分析錶明C組鼠抗人白蛋白單剋隆抗體(ALB)錶達最為明顯.結論:證明3種組閤均可成功將骨髓間充質榦細胞嚮肝樣細胞誘導分化,均能分泌肝細胞特異性標記如鼠抗人甲胎蛋白單剋隆抗體(AFP)、ALB、糖原,其中C組效果最為突齣.
목적:탐색골수간충질간세포(BM-MSCs)향간세포유도적최유효방법,병대유도후적세포진행감정.방법:취건강성인적괄량골수,채용제도밀도리심법분리BM-MSCs병행첩벽배양,확증지제3대,취제3대세포분3조분별진행유도.A조:간세포생장인자(HGF)+표피생장인자(EGF);B조:간세포생장인자(HGF)+성섬유생장인자(FGF);C조:간세포생장인자(HGF)+표피생장인자(HGF)+성섬유생장인자(HGF).분별진행배양,유도전통과류식세포의분석세포표면표지CD44、CD90적표체솔대배양적BM-MSCs진행감정,유도후통과RT-PCR、면역조직화학법、당원염색검측감정기유도분화천황.결과:본문통과건립종인골수중분리、배양、확증、전대、순화BM-MSCs,정향유도분화,사기성공향간양세포전화,도상분석표명C조서항인백단백단극륭항체(ALB)표체최위명현.결론:증명3충조합균가성공장골수간충질간세포향간양세포유도분화,균능분비간세포특이성표기여서항인갑태단백단극륭항체(AFP)、ALB、당원,기중C조효과최위돌출.
