重庆师范大学学报（自然科学版）
重慶師範大學學報（自然科學版）
중경사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF CHONGQING NORMAL UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2012年
1期
35-37
,共3页
姜春宝%王林玲%王钰%王丽君
薑春寶%王林玲%王鈺%王麗君
강춘보%왕림령%왕옥%왕려군
家蚕卵%微孢子虫%蛋白质提取%十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳
傢蠶卵%微孢子蟲%蛋白質提取%十二烷基磺痠鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳
가잠란%미포자충%단백질제취%십이완기광산납취병희선알응효전영
本研究探讨了蛋白质提取方法、十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)条件对家蚕卵蛋白分离效果的影响.分别用裂解液提取法、TCA沉淀法、冷丙酮沉淀法和TCA-丙酮沉淀法制备蛋白质样品,然后进行6％～12％、6％～15％两种梯度胶的SDS-PAGE,获得了不同提取方法和电泳条件下的电泳图谱用以比较家蚕卵蛋白分离效果.结果表明用TCA-丙酮沉淀法除盐,再用含9mol·L-1尿素、4％ CHAPS、1％ DTT的裂解液重悬,最适合家蚕卵蛋白提取；6％～12％梯度胶对家蚕卵蛋白的分离较为适宜.利用这一优化方法对家蚕感染微孢子虫的蚕卵和正常蚕卵进行了比较研究,在分子量66 kD和85 kD处找到了与感染微孢子虫相关的蛋白,为进一步进行正常蚕卵和感染微孢子虫蚕卵的蛋白质组学研究奠定了基础.
本研究探討瞭蛋白質提取方法、十二烷基磺痠鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)條件對傢蠶卵蛋白分離效果的影響.分彆用裂解液提取法、TCA沉澱法、冷丙酮沉澱法和TCA-丙酮沉澱法製備蛋白質樣品,然後進行6％～12％、6％～15％兩種梯度膠的SDS-PAGE,穫得瞭不同提取方法和電泳條件下的電泳圖譜用以比較傢蠶卵蛋白分離效果.結果錶明用TCA-丙酮沉澱法除鹽,再用含9mol·L-1尿素、4％ CHAPS、1％ DTT的裂解液重懸,最適閤傢蠶卵蛋白提取；6％～12％梯度膠對傢蠶卵蛋白的分離較為適宜.利用這一優化方法對傢蠶感染微孢子蟲的蠶卵和正常蠶卵進行瞭比較研究,在分子量66 kD和85 kD處找到瞭與感染微孢子蟲相關的蛋白,為進一步進行正常蠶卵和感染微孢子蟲蠶卵的蛋白質組學研究奠定瞭基礎.
본연구탐토료단백질제취방법、십이완기광산납취병희선알응효전영(SDS-PAGE)조건대가잠란단백분리효과적영향.분별용렬해액제취법、TCA침정법、랭병동침정법화TCA-병동침정법제비단백질양품,연후진행6％～12％、6％～15％량충제도효적SDS-PAGE,획득료불동제취방법화전영조건하적전영도보용이비교가잠란단백분리효과.결과표명용TCA-병동침정법제염,재용함9mol·L-1뇨소、4％ CHAPS、1％ DTT적렬해액중현,최괄합가잠란단백제취；6％～12％제도효대가잠란단백적분리교위괄의.이용저일우화방법대가잠감염미포자충적잠란화정상잠란진행료비교연구,재분자량66 kD화85 kD처조도료여감염미포자충상관적단백,위진일보진행정상잠란화감염미포자충잠란적단백질조학연구전정료기출.
