中国耳鼻咽喉头颈外科
中國耳鼻嚥喉頭頸外科
중국이비인후두경외과
CHINESE ARCHIVER OF OTOLARYNGOLOGY-HEAD AND NECK SURGERY
2006年
11期
766-770
,共5页
唐瑶云%钟宇%赵素萍%肖健云
唐瑤雲%鐘宇%趙素萍%肖健雲
당요운%종우%조소평%초건운
胞嘧啶脱氨酶%尿嘧啶%糖基转移酶%基因疗法%鼻咽肿瘤
胞嘧啶脫氨酶%尿嘧啶%糖基轉移酶%基因療法%鼻嚥腫瘤
포밀정탈안매%뇨밀정%당기전이매%기인요법%비인종류
目的 研究胞嘧啶脱氨酶-尿嘧啶磷酸核糖基转移酶融合基因/5-氟胞嘧啶(fusion cytosine deaminaseuracil phosphoribosyl transferase gene/5-Flurocytosine,FCU/5-FC)对鼻咽癌CNE-2细胞的杀伤效应以及对鼻咽癌移植瘤生长的抑制作用.方法 构建表达质粒载体pcDNA3.1(-)CMVe·Egr-1·FCU,BamHⅠ酶切鉴定重组质粒,分析FCU基因和融合启动子CMVe·Egr-1的序列.电穿孔法将重组质粒转染CNE-2细胞,300 μg/ml～600 μg/mlG41 8筛选1 4天获得稳定表达FCU基因的CN E-2细胞,RT-PCR鉴定FCU基因的表达.以转染空白载体pcDNA3.1(-)的CNE-2细胞为对照,MTT法观察5-FC对表达FCU基因的CNE-2细胞生长的抑制作用,考察FCU基因的细胞旁杀效应.5×106的CNE-2细胞接种裸鼠右腋下,建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,12天后将裸鼠随机分成3组:CU组,CU+PBS组和CU+5-FC组,观察不同处理对移植瘤生长的抑制作用.结果 酶切和序列分析证明重组质粒含完整的FCU基因和Egr-1启动子的核心序列,RT-PCR从转染细胞总RNA中扩出330bp的预期片段.表达FCU基因的CNE-2细胞在5-FC干预下,生长受到抑制.随着表达FCU基因的细胞比例增加,细胞存活率相应地下降.CU组,CU+PBS组移植瘤体积与CU+5-FC组有显著性差异(P＜0.05).结论 表达FCU基因的CNE-2细胞可以被5-FC杀伤,FCU/5-FC系统抑制了移植瘤生长,为治疗鼻咽癌提供了新的策略.
目的 研究胞嘧啶脫氨酶-尿嘧啶燐痠覈糖基轉移酶融閤基因/5-氟胞嘧啶(fusion cytosine deaminaseuracil phosphoribosyl transferase gene/5-Flurocytosine,FCU/5-FC)對鼻嚥癌CNE-2細胞的殺傷效應以及對鼻嚥癌移植瘤生長的抑製作用.方法 構建錶達質粒載體pcDNA3.1(-)CMVe·Egr-1·FCU,BamHⅠ酶切鑒定重組質粒,分析FCU基因和融閤啟動子CMVe·Egr-1的序列.電穿孔法將重組質粒轉染CNE-2細胞,300 μg/ml～600 μg/mlG41 8篩選1 4天穫得穩定錶達FCU基因的CN E-2細胞,RT-PCR鑒定FCU基因的錶達.以轉染空白載體pcDNA3.1(-)的CNE-2細胞為對照,MTT法觀察5-FC對錶達FCU基因的CNE-2細胞生長的抑製作用,攷察FCU基因的細胞徬殺效應.5×106的CNE-2細胞接種裸鼠右腋下,建立鼻嚥癌裸鼠移植瘤模型,12天後將裸鼠隨機分成3組:CU組,CU+PBS組和CU+5-FC組,觀察不同處理對移植瘤生長的抑製作用.結果 酶切和序列分析證明重組質粒含完整的FCU基因和Egr-1啟動子的覈心序列,RT-PCR從轉染細胞總RNA中擴齣330bp的預期片段.錶達FCU基因的CNE-2細胞在5-FC榦預下,生長受到抑製.隨著錶達FCU基因的細胞比例增加,細胞存活率相應地下降.CU組,CU+PBS組移植瘤體積與CU+5-FC組有顯著性差異(P＜0.05).結論 錶達FCU基因的CNE-2細胞可以被5-FC殺傷,FCU/5-FC繫統抑製瞭移植瘤生長,為治療鼻嚥癌提供瞭新的策略.
목적 연구포밀정탈안매-뇨밀정린산핵당기전이매융합기인/5-불포밀정(fusion cytosine deaminaseuracil phosphoribosyl transferase gene/5-Flurocytosine,FCU/5-FC)대비인암CNE-2세포적살상효응이급대비인암이식류생장적억제작용.방법 구건표체질립재체pcDNA3.1(-)CMVe·Egr-1·FCU,BamHⅠ매절감정중조질립,분석FCU기인화융합계동자CMVe·Egr-1적서렬.전천공법장중조질립전염CNE-2세포,300 μg/ml～600 μg/mlG41 8사선1 4천획득은정표체FCU기인적CN E-2세포,RT-PCR감정FCU기인적표체.이전염공백재체pcDNA3.1(-)적CNE-2세포위대조,MTT법관찰5-FC대표체FCU기인적CNE-2세포생장적억제작용,고찰FCU기인적세포방살효응.5×106적CNE-2세포접충라서우액하,건립비인암라서이식류모형,12천후장라서수궤분성3조:CU조,CU+PBS조화CU+5-FC조,관찰불동처리대이식류생장적억제작용.결과 매절화서렬분석증명중조질립함완정적FCU기인화Egr-1계동자적핵심서렬,RT-PCR종전염세포총RNA중확출330bp적예기편단.표체FCU기인적CNE-2세포재5-FC간예하,생장수도억제.수착표체FCU기인적세포비례증가,세포존활솔상응지하강.CU조,CU+PBS조이식류체적여CU+5-FC조유현저성차이(P＜0.05).결론 표체FCU기인적CNE-2세포가이피5-FC살상,FCU/5-FC계통억제료이식류생장,위치료비인암제공료신적책략.
