实用肝脏病杂志
實用肝髒病雜誌
실용간장병잡지
JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
2010年
2期
85-88
,共4页
何长伦%王寿明%郑纪山%张益红%唐雨德
何長倫%王壽明%鄭紀山%張益紅%唐雨德
하장륜%왕수명%정기산%장익홍%당우덕
慢性乙型肝炎%细胞毒T细胞%细胞克隆%表位
慢性乙型肝炎%細胞毒T細胞%細胞剋隆%錶位
만성을형간염%세포독T세포%세포극륭%표위
目的 建立HLA-A*2402限制的HBcAg特异性CTL细胞克隆.方法 取HLA-A*2402阳性的慢性HBV感染者的PBMC,用限制性表位肽(HBV core 117-125,EYLVSFGVW)和重组HBcAg刺激,并以有限稀释法对活化的T细胞进行克隆化,用免疫荧光染色、流式细胞术以及乳酸脱氢酶释放实验对所获克隆进行鉴定.结果 PBMC经表位肽激活后,特异性细胞毒活性达到43.7%;从活化细胞获得11株T细胞克隆;除2株是CD4CT细胞克隆外,其余9株为CD8+T细胞克隆,其中2株为Tc1,3株为Tc2和4株为Tc0.9株CD8+T克隆在效/靶比例为2.5:1时均具有HBcAg特异性靶细胞溶解活性(33.9%～90.2%).结论 用HBVcore 117-125能激活HLA-A*2402阳性的慢性HBV感染者外周血CD8+T细胞,随之建立的9株CD8+T克隆均具有HBcAg表位特异性细胞毒活性.
目的 建立HLA-A*2402限製的HBcAg特異性CTL細胞剋隆.方法 取HLA-A*2402暘性的慢性HBV感染者的PBMC,用限製性錶位肽(HBV core 117-125,EYLVSFGVW)和重組HBcAg刺激,併以有限稀釋法對活化的T細胞進行剋隆化,用免疫熒光染色、流式細胞術以及乳痠脫氫酶釋放實驗對所穫剋隆進行鑒定.結果 PBMC經錶位肽激活後,特異性細胞毒活性達到43.7%;從活化細胞穫得11株T細胞剋隆;除2株是CD4CT細胞剋隆外,其餘9株為CD8+T細胞剋隆,其中2株為Tc1,3株為Tc2和4株為Tc0.9株CD8+T剋隆在效/靶比例為2.5:1時均具有HBcAg特異性靶細胞溶解活性(33.9%～90.2%).結論 用HBVcore 117-125能激活HLA-A*2402暘性的慢性HBV感染者外週血CD8+T細胞,隨之建立的9株CD8+T剋隆均具有HBcAg錶位特異性細胞毒活性.
목적 건립HLA-A*2402한제적HBcAg특이성CTL세포극륭.방법 취HLA-A*2402양성적만성HBV감염자적PBMC,용한제성표위태(HBV core 117-125,EYLVSFGVW)화중조HBcAg자격,병이유한희석법대활화적T세포진행극륭화,용면역형광염색、류식세포술이급유산탈경매석방실험대소획극륭진행감정.결과 PBMC경표위태격활후,특이성세포독활성체도43.7%;종활화세포획득11주T세포극륭;제2주시CD4CT세포극륭외,기여9주위CD8+T세포극륭,기중2주위Tc1,3주위Tc2화4주위Tc0.9주CD8+T극륭재효/파비례위2.5:1시균구유HBcAg특이성파세포용해활성(33.9%～90.2%).결론 용HBVcore 117-125능격활HLA-A*2402양성적만성HBV감염자외주혈CD8+T세포,수지건립적9주CD8+T극륭균구유HBcAg표위특이성세포독활성.
