中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2011年
11期
28-30
,共3页
陈立瑾%田利源%李秀丽%汪莉%王玉民%陈树林
陳立瑾%田利源%李秀麗%汪莉%王玉民%陳樹林
진립근%전리원%리수려%왕리%왕옥민%진수림
Fam12b%分泌蛋白%原核表达%亲和纯化
Fam12b%分泌蛋白%原覈錶達%親和純化
Fam12b%분비단백%원핵표체%친화순화
本研究旨在克隆小鼠附睾基因fam12b,构建pET28(a)-fam12b-fam12b原核表达重组质粒,从大肠杆菌Rosetta (DE3)中获得融合蛋白.应用RT-PCR方法从小鼠附睾中扩增出fam12编码序列,串联克隆至原核表达载体pET28(a),转化大肠杆菌Rosetta (DE3)细胞,诱导表达,Ni NTA纯化融合蛋白.结果显示,获得小鼠附睾基因fam12b,纯化后的融合蛋白经过SDS-PAGE和Western印记分析鉴定,在相对分子质量31 kD处有特异的条带,并获得高纯度融合蛋白.本研究成功克隆了小鼠附睾基因fam12b,并从Rosetta (DE3)中获得高纯度融合蛋白,为进一步研究Fam12b的功能创造了条件.
本研究旨在剋隆小鼠附睪基因fam12b,構建pET28(a)-fam12b-fam12b原覈錶達重組質粒,從大腸桿菌Rosetta (DE3)中穫得融閤蛋白.應用RT-PCR方法從小鼠附睪中擴增齣fam12編碼序列,串聯剋隆至原覈錶達載體pET28(a),轉化大腸桿菌Rosetta (DE3)細胞,誘導錶達,Ni NTA純化融閤蛋白.結果顯示,穫得小鼠附睪基因fam12b,純化後的融閤蛋白經過SDS-PAGE和Western印記分析鑒定,在相對分子質量31 kD處有特異的條帶,併穫得高純度融閤蛋白.本研究成功剋隆瞭小鼠附睪基因fam12b,併從Rosetta (DE3)中穫得高純度融閤蛋白,為進一步研究Fam12b的功能創造瞭條件.
본연구지재극륭소서부고기인fam12b,구건pET28(a)-fam12b-fam12b원핵표체중조질립,종대장간균Rosetta (DE3)중획득융합단백.응용RT-PCR방법종소서부고중확증출fam12편마서렬,천련극륭지원핵표체재체pET28(a),전화대장간균Rosetta (DE3)세포,유도표체,Ni NTA순화융합단백.결과현시,획득소서부고기인fam12b,순화후적융합단백경과SDS-PAGE화Western인기분석감정,재상대분자질량31 kD처유특이적조대,병획득고순도융합단백.본연구성공극륭료소서부고기인fam12b,병종Rosetta (DE3)중획득고순도융합단백,위진일보연구Fam12b적공능창조료조건.
