中华肿瘤杂志
中華腫瘤雜誌
중화종류잡지
CHINESE JOURNAL OF ONCOLOGY
2002年
5期
455-457
,共3页
王孟龙%殷正丰%吴宗娣%王率%钱海华%康晓燕%吴孟超
王孟龍%慇正豐%吳宗娣%王率%錢海華%康曉燕%吳孟超
왕맹룡%은정봉%오종제%왕솔%전해화%강효연%오맹초
癌,肝细胞%缺氧%血管内皮生长因子%胸苷激酶%腺病毒载体
癌,肝細胞%缺氧%血管內皮生長因子%胸苷激酶%腺病毒載體
암,간세포%결양%혈관내피생장인자%흉감격매%선병독재체
目的探讨缺氧对腺病毒介导的血管内皮生长因子启动子-胸苷激酶系统(AdVEGF-tk)对肝癌细胞系HepG2选择性杀伤活性的增强作用.方法采用AdEasy system 构建重组腺病毒载体AdVEGF-tk和AdVEGF-GFP,在293细胞中包装、扩增后,分别感染LO2(正常肝细胞系)和HepG2.AdVEGF-GFP感染细胞经正常培养24 h后,在荧光显微镜下观察其荧光蛋白表达情况;AdVEGF-tk感染细胞在缺氧或不缺氧条件下培养,并给予不同浓度的丙氧鸟苷(GCV)处理,用MTT法检测感染细胞的增殖情况.结果 AdVEGF-GFP感染的L02细胞仅见稀散的荧光,而AdVEGF-GFP感染的HepG2细胞则出现大量荧光.感染AdVEGF-tk后,当感染指数(MOI)为100且GCV浓度为10 μg/ml时,L02细胞在不缺氧条件下对GCV几乎不敏感,但在缺氧条件下,70%以上的细胞被杀死;而 HepG2细胞即便在不缺氧培养条件下也有60%以上的细胞被杀死,缺氧则使80%以上细胞被杀死.结论缺氧可加强腺病毒介导的AdVEGF-tk系统对体外培养肝癌细胞的选择性杀伤作用.
目的探討缺氧對腺病毒介導的血管內皮生長因子啟動子-胸苷激酶繫統(AdVEGF-tk)對肝癌細胞繫HepG2選擇性殺傷活性的增彊作用.方法採用AdEasy system 構建重組腺病毒載體AdVEGF-tk和AdVEGF-GFP,在293細胞中包裝、擴增後,分彆感染LO2(正常肝細胞繫)和HepG2.AdVEGF-GFP感染細胞經正常培養24 h後,在熒光顯微鏡下觀察其熒光蛋白錶達情況;AdVEGF-tk感染細胞在缺氧或不缺氧條件下培養,併給予不同濃度的丙氧鳥苷(GCV)處理,用MTT法檢測感染細胞的增殖情況.結果 AdVEGF-GFP感染的L02細胞僅見稀散的熒光,而AdVEGF-GFP感染的HepG2細胞則齣現大量熒光.感染AdVEGF-tk後,噹感染指數(MOI)為100且GCV濃度為10 μg/ml時,L02細胞在不缺氧條件下對GCV幾乎不敏感,但在缺氧條件下,70%以上的細胞被殺死;而 HepG2細胞即便在不缺氧培養條件下也有60%以上的細胞被殺死,缺氧則使80%以上細胞被殺死.結論缺氧可加彊腺病毒介導的AdVEGF-tk繫統對體外培養肝癌細胞的選擇性殺傷作用.
목적탐토결양대선병독개도적혈관내피생장인자계동자-흉감격매계통(AdVEGF-tk)대간암세포계HepG2선택성살상활성적증강작용.방법채용AdEasy system 구건중조선병독재체AdVEGF-tk화AdVEGF-GFP,재293세포중포장、확증후,분별감염LO2(정상간세포계)화HepG2.AdVEGF-GFP감염세포경정상배양24 h후,재형광현미경하관찰기형광단백표체정황;AdVEGF-tk감염세포재결양혹불결양조건하배양,병급여불동농도적병양조감(GCV)처리,용MTT법검측감염세포적증식정황.결과 AdVEGF-GFP감염적L02세포부견희산적형광,이AdVEGF-GFP감염적HepG2세포칙출현대량형광.감염AdVEGF-tk후,당감염지수(MOI)위100차GCV농도위10 μg/ml시,L02세포재불결양조건하대GCV궤호불민감,단재결양조건하,70%이상적세포피살사;이 HepG2세포즉편재불결양배양조건하야유60%이상적세포피살사,결양칙사80%이상세포피살사.결론결양가가강선병독개도적AdVEGF-tk계통대체외배양간암세포적선택성살상작용.
