南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2007年
2期
156-159
,共4页
汪群力%裴国献%云雄%金丹%魏宽海%任高宏
汪群力%裴國獻%雲雄%金丹%魏寬海%任高宏
왕군력%배국헌%운웅%금단%위관해%임고굉
组织工程%绿色荧光蛋白%骨,恒河猴
組織工程%綠色熒光蛋白%骨,恆河猴
조직공정%록색형광단백%골,항하후
目的 用绿色荧光蛋白(GFP)标记恒河猴骨髓基质干细胞(rBMSC),以示踪其在体内参与组织工程骨形成的情况.方法 用OBI-293A细胞对腺病毒Ad5.CMV-GFP进行扩增,用Ad5.CMV-GFP转染rBMSc,将转染成功的第三代BMSc在转染后48 h消化制成细胞悬液,接种至块状可吸收HA上,体外培养3 d后,将其植入恒河猴(同体移植)背阔肌的肌袋内,以未转染GFP的BMSC用同样的方法接种块状可吸收HA上,作为对照,术后6周取材,4%的中性多聚甲醛固定,塑料包埋,制作骨磨片PI染色在激光共聚焦显微镜下进行观测.结果 转染GFP后,rBMSc仍贴壁生长,呈梭形或多角形,仍分裂增殖,但增殖速度有所降低.48 h可见细胞发出强烈的荧光,呈全细胞分布,计数转染率达80%.在激光共聚焦显微镜下观察骨磨片,可见材料内有发出较强荧光的细胞结构,能同时被PI染液着色.结论 绿色荧光蛋白能有效示踪组织工程骨种子细胞,种人体内的BMSC是组织工程骨骨组织形成的主要细胞来源.
目的 用綠色熒光蛋白(GFP)標記恆河猴骨髓基質榦細胞(rBMSC),以示蹤其在體內參與組織工程骨形成的情況.方法 用OBI-293A細胞對腺病毒Ad5.CMV-GFP進行擴增,用Ad5.CMV-GFP轉染rBMSc,將轉染成功的第三代BMSc在轉染後48 h消化製成細胞懸液,接種至塊狀可吸收HA上,體外培養3 d後,將其植入恆河猴(同體移植)揹闊肌的肌袋內,以未轉染GFP的BMSC用同樣的方法接種塊狀可吸收HA上,作為對照,術後6週取材,4%的中性多聚甲醛固定,塑料包埋,製作骨磨片PI染色在激光共聚焦顯微鏡下進行觀測.結果 轉染GFP後,rBMSc仍貼壁生長,呈梭形或多角形,仍分裂增殖,但增殖速度有所降低.48 h可見細胞髮齣彊烈的熒光,呈全細胞分佈,計數轉染率達80%.在激光共聚焦顯微鏡下觀察骨磨片,可見材料內有髮齣較彊熒光的細胞結構,能同時被PI染液著色.結論 綠色熒光蛋白能有效示蹤組織工程骨種子細胞,種人體內的BMSC是組織工程骨骨組織形成的主要細胞來源.
목적 용록색형광단백(GFP)표기항하후골수기질간세포(rBMSC),이시종기재체내삼여조직공정골형성적정황.방법 용OBI-293A세포대선병독Ad5.CMV-GFP진행확증,용Ad5.CMV-GFP전염rBMSc,장전염성공적제삼대BMSc재전염후48 h소화제성세포현액,접충지괴상가흡수HA상,체외배양3 d후,장기식입항하후(동체이식)배활기적기대내,이미전염GFP적BMSC용동양적방법접충괴상가흡수HA상,작위대조,술후6주취재,4%적중성다취갑철고정,소료포매,제작골마편PI염색재격광공취초현미경하진행관측.결과 전염GFP후,rBMSc잉첩벽생장,정사형혹다각형,잉분렬증식,단증식속도유소강저.48 h가견세포발출강렬적형광,정전세포분포,계수전염솔체80%.재격광공취초현미경하관찰골마편,가견재료내유발출교강형광적세포결구,능동시피PI염액착색.결론 록색형광단백능유효시종조직공정골충자세포,충인체내적BMSC시조직공정골골조직형성적주요세포래원.
