解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2009年
2期
260-264,306
,共6页
王海萍%张雷%王立轩%赵静
王海萍%張雷%王立軒%趙靜
왕해평%장뢰%왕립헌%조정
骨髓间充质干细胞%骨形态蛋白2%心肌细胞%分化%细胞培养%大鼠
骨髓間充質榦細胞%骨形態蛋白2%心肌細胞%分化%細胞培養%大鼠
골수간충질간세포%골형태단백2%심기세포%분화%세포배양%대서
目的 应用骨形态蛋白2(BMP-2)体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化,探索MSCs向心肌细胞分化的诱导方法.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分离培养MSCs,应用BMP-2定向诱导,相差显微镜观察细胞形态学变化,应用免疫细胞化学、激光扫描共焦显微镜技术检测结蛋白(desmin)、α-横纹肌肌动蛋白(α-sareomeric actin)、心肌特异性肌钙蛋白(C-TnT)的表达,透射电镜鉴定.在诱导后7d、21d和28d 3个时间点以半定量RT-PCR方法检测细胞心肌早期转录因子(GATA4)和心肌特异性α-肌凝蛋白重链(α-MHC)的表达.结果 BMP-2诱导后的MSCs细胞伸出伪足,排列方向渐趋一致.MSCs体外经BMP-2诱导后分化的细胞结蛋白、α-横纹肌肌动蛋白、C-TnT均表达阳性,结蛋白、α-横级肌肌动蛋白阳性率较高,分别为37.28%和63.94%,而C-TnT阳性率较低为34.66%.透射电镜下可见到平行排列的肌丝,大量的粗面内质网和线粒体,富含糖原和核糖体.RT-PCR结果显示,GATA4于诱导后7d弱表达,21d表达增强,28d表达减弱.α-MHC在诱导后7d不表达,21d弱表达,28d表达明显.结论骨髓间充质干细胞在BMP-2诱导下可定向分化为心肌样细胞,是自体心肌细胞的一种良好供体来源.
目的 應用骨形態蛋白2(BMP-2)體外誘導骨髓間充質榦細胞(MSCs)嚮心肌樣細胞分化,探索MSCs嚮心肌細胞分化的誘導方法.方法 取SD大鼠四肢骨骨髓,分離培養MSCs,應用BMP-2定嚮誘導,相差顯微鏡觀察細胞形態學變化,應用免疫細胞化學、激光掃描共焦顯微鏡技術檢測結蛋白(desmin)、α-橫紋肌肌動蛋白(α-sareomeric actin)、心肌特異性肌鈣蛋白(C-TnT)的錶達,透射電鏡鑒定.在誘導後7d、21d和28d 3箇時間點以半定量RT-PCR方法檢測細胞心肌早期轉錄因子(GATA4)和心肌特異性α-肌凝蛋白重鏈(α-MHC)的錶達.結果 BMP-2誘導後的MSCs細胞伸齣偽足,排列方嚮漸趨一緻.MSCs體外經BMP-2誘導後分化的細胞結蛋白、α-橫紋肌肌動蛋白、C-TnT均錶達暘性,結蛋白、α-橫級肌肌動蛋白暘性率較高,分彆為37.28%和63.94%,而C-TnT暘性率較低為34.66%.透射電鏡下可見到平行排列的肌絲,大量的粗麵內質網和線粒體,富含糖原和覈糖體.RT-PCR結果顯示,GATA4于誘導後7d弱錶達,21d錶達增彊,28d錶達減弱.α-MHC在誘導後7d不錶達,21d弱錶達,28d錶達明顯.結論骨髓間充質榦細胞在BMP-2誘導下可定嚮分化為心肌樣細胞,是自體心肌細胞的一種良好供體來源.
목적 응용골형태단백2(BMP-2)체외유도골수간충질간세포(MSCs)향심기양세포분화,탐색MSCs향심기세포분화적유도방법.방법 취SD대서사지골골수,분리배양MSCs,응용BMP-2정향유도,상차현미경관찰세포형태학변화,응용면역세포화학、격광소묘공초현미경기술검측결단백(desmin)、α-횡문기기동단백(α-sareomeric actin)、심기특이성기개단백(C-TnT)적표체,투사전경감정.재유도후7d、21d화28d 3개시간점이반정량RT-PCR방법검측세포심기조기전록인자(GATA4)화심기특이성α-기응단백중련(α-MHC)적표체.결과 BMP-2유도후적MSCs세포신출위족,배렬방향점추일치.MSCs체외경BMP-2유도후분화적세포결단백、α-횡문기기동단백、C-TnT균표체양성,결단백、α-횡급기기동단백양성솔교고,분별위37.28%화63.94%,이C-TnT양성솔교저위34.66%.투사전경하가견도평행배렬적기사,대량적조면내질망화선립체,부함당원화핵당체.RT-PCR결과현시,GATA4우유도후7d약표체,21d표체증강,28d표체감약.α-MHC재유도후7d불표체,21d약표체,28d표체명현.결론골수간충질간세포재BMP-2유도하가정향분화위심기양세포,시자체심기세포적일충량호공체래원.
