温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2010年
2期
141-144
,共4页
金思思%吴金明%黄智铭%吴建胜%申苏建
金思思%吳金明%黃智銘%吳建勝%申囌建
금사사%오금명%황지명%오건성%신소건
甲胎蛋白%镇痛抗肿瘤肽%真核表达载体%肝肿瘤
甲胎蛋白%鎮痛抗腫瘤肽%真覈錶達載體%肝腫瘤
갑태단백%진통항종류태%진핵표체재체%간종류
目的:构建肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)特异性镇痛抗肿瘤肽(analgesic-antitumor peptide,AGAP)基因真核表达载体,利用计算机辅助分析和预测所表达蛋白质的理化和结构特征,为探索生物毒素靶向抗肝癌作用奠定基础.方法:提取东亚钳蝎总RNA,用RT -PCR法扩增出AGAP基因,与载体pGL3/AFP连接构建重组质粒,酶切及测序鉴定,并利用蛋白质分析软件对其表达的蛋白二级结构水平及一些生物学特性进行预测,并转染HepG2细胞检测其是否表达.结果:重组质粒所表达的目的多肽经软件分析,发现在二级结构上没有变化,亲水性、抗原性等生物学活性也未受影响,转染HepG2细胞后能成功表达.结论:人AFP基因顺式作用元件调控AGAP真核表达载体构建成功.
目的:構建肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)特異性鎮痛抗腫瘤肽(analgesic-antitumor peptide,AGAP)基因真覈錶達載體,利用計算機輔助分析和預測所錶達蛋白質的理化和結構特徵,為探索生物毒素靶嚮抗肝癌作用奠定基礎.方法:提取東亞鉗蝎總RNA,用RT -PCR法擴增齣AGAP基因,與載體pGL3/AFP連接構建重組質粒,酶切及測序鑒定,併利用蛋白質分析軟件對其錶達的蛋白二級結構水平及一些生物學特性進行預測,併轉染HepG2細胞檢測其是否錶達.結果:重組質粒所錶達的目的多肽經軟件分析,髮現在二級結構上沒有變化,親水性、抗原性等生物學活性也未受影響,轉染HepG2細胞後能成功錶達.結論:人AFP基因順式作用元件調控AGAP真覈錶達載體構建成功.
목적:구건간세포암(hepatocellular carcinoma,HCC)특이성진통항종류태(analgesic-antitumor peptide,AGAP)기인진핵표체재체,이용계산궤보조분석화예측소표체단백질적이화화결구특정,위탐색생물독소파향항간암작용전정기출.방법:제취동아겸갈총RNA,용RT -PCR법확증출AGAP기인,여재체pGL3/AFP련접구건중조질립,매절급측서감정,병이용단백질분석연건대기표체적단백이급결구수평급일사생물학특성진행예측,병전염HepG2세포검측기시부표체.결과:중조질립소표체적목적다태경연건분석,발현재이급결구상몰유변화,친수성、항원성등생물학활성야미수영향,전염HepG2세포후능성공표체.결론:인AFP기인순식작용원건조공AGAP진핵표체재체구건성공.