中国实验动物学报
中國實驗動物學報
중국실험동물학보
ACTA LABORATORIUM ANIMALIS SCIENTIA SINICA
2010年
6期
463-466,后插3-后插4
,共5页
刘树滔%何火聪%陈菁%傅蓉%潘剑茹%饶平凡
劉樹滔%何火聰%陳菁%傅蓉%潘劍茹%饒平凡
류수도%하화총%진정%부용%반검여%요평범
TAT蛋白转导结构域%融合蛋白%跨膜递送%皮肤%器官
TAT蛋白轉導結構域%融閤蛋白%跨膜遞送%皮膚%器官
TAT단백전도결구역%융합단백%과막체송%피부%기관
目的 探讨跨膜递送短肽--TAT蛋白转导结构域(简称TAT)介导的与其融合的活性蛋白在活体的跨膜递送作用.方法 以融合蛋白GST-TAT-GFP,GST-GFP-TAT和GST-GFP为研究模型蛋白,不经过蛋白质的变性处理、直接通过向小鼠腹腔注射和皮肤涂抹这两种含TAT的融合蛋白及作为对照的融合蛋白GST-GFP,一定时间作用后取体内器官和皮肤做冷冻切片,荧光显微镜检测这些融合蛋白的跨膜递送情况;并对分别融合在C端或者N端的TAT介导GFP在活体动物体内和皮肤的跨膜递送作用进行对比.结果 腹腔注射实验结果表明,TAT可以介导不经过蛋白质的变性处理的融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT跨膜递送进入到小鼠的心脏、肝、肾、脾和肺,甚至脑组织;其中GST-GFP-TAT跨膜递送效率比GST-TAT-GFP更高.结构模拟分析提示GST-GFP-TAT与GST-TAT-GFP中的TAT的暴露情况不同可能是造成两种蛋白跨膜递送活性差异的重要因素.皮肤实验的结果则表明TAT不仅介导融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT进入小鼠表皮,而且使其进入小鼠皮肤的真皮层.结论 TAT可以跨膜递送不经过变性处理的融合蛋白进入小鼠皮肤和体内,递送效率可能与TAT的暴露程度相关;这些结果为在蛋白质疗法方面应用TAT提供了进一步的理论依据.
目的 探討跨膜遞送短肽--TAT蛋白轉導結構域(簡稱TAT)介導的與其融閤的活性蛋白在活體的跨膜遞送作用.方法 以融閤蛋白GST-TAT-GFP,GST-GFP-TAT和GST-GFP為研究模型蛋白,不經過蛋白質的變性處理、直接通過嚮小鼠腹腔註射和皮膚塗抹這兩種含TAT的融閤蛋白及作為對照的融閤蛋白GST-GFP,一定時間作用後取體內器官和皮膚做冷凍切片,熒光顯微鏡檢測這些融閤蛋白的跨膜遞送情況;併對分彆融閤在C耑或者N耑的TAT介導GFP在活體動物體內和皮膚的跨膜遞送作用進行對比.結果 腹腔註射實驗結果錶明,TAT可以介導不經過蛋白質的變性處理的融閤蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT跨膜遞送進入到小鼠的心髒、肝、腎、脾和肺,甚至腦組織;其中GST-GFP-TAT跨膜遞送效率比GST-TAT-GFP更高.結構模擬分析提示GST-GFP-TAT與GST-TAT-GFP中的TAT的暴露情況不同可能是造成兩種蛋白跨膜遞送活性差異的重要因素.皮膚實驗的結果則錶明TAT不僅介導融閤蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT進入小鼠錶皮,而且使其進入小鼠皮膚的真皮層.結論 TAT可以跨膜遞送不經過變性處理的融閤蛋白進入小鼠皮膚和體內,遞送效率可能與TAT的暴露程度相關;這些結果為在蛋白質療法方麵應用TAT提供瞭進一步的理論依據.
목적 탐토과막체송단태--TAT단백전도결구역(간칭TAT)개도적여기융합적활성단백재활체적과막체송작용.방법 이융합단백GST-TAT-GFP,GST-GFP-TAT화GST-GFP위연구모형단백,불경과단백질적변성처리、직접통과향소서복강주사화피부도말저량충함TAT적융합단백급작위대조적융합단백GST-GFP,일정시간작용후취체내기관화피부주냉동절편,형광현미경검측저사융합단백적과막체송정황;병대분별융합재C단혹자N단적TAT개도GFP재활체동물체내화피부적과막체송작용진행대비.결과 복강주사실험결과표명,TAT가이개도불경과단백질적변성처리적융합단백GST-TAT-GFP화GST-GFP-TAT과막체송진입도소서적심장、간、신、비화폐,심지뇌조직;기중GST-GFP-TAT과막체송효솔비GST-TAT-GFP경고.결구모의분석제시GST-GFP-TAT여GST-TAT-GFP중적TAT적폭로정황불동가능시조성량충단백과막체송활성차이적중요인소.피부실험적결과칙표명TAT불부개도융합단백GST-TAT-GFP화GST-GFP-TAT진입소서표피,이차사기진입소서피부적진피층.결론 TAT가이과막체송불경과변성처리적융합단백진입소서피부화체내,체송효솔가능여TAT적폭로정도상관;저사결과위재단백질요법방면응용TAT제공료진일보적이론의거.
