生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
10期
139-144
,共6页
阳辛凤%徐林%弓淑芳%郭安平%孔华%贺立卡
暘辛鳳%徐林%弓淑芳%郭安平%孔華%賀立卡
양신봉%서림%궁숙방%곽안평%공화%하립잡
酿酒酵母%载体%CUP1%多基因转化
釀酒酵母%載體%CUP1%多基因轉化
양주효모%재체%CUP1%다기인전화
为了赋予工业酿酒酵母对淀粉和纤维素的降解活性,提高酿酒酵母对粗木薯粉进行酒精发酵时的酒精产率；另一方面,为了解决工业酿酒酵母不适于使用营养缺陷型筛选标记对转化子进行筛选的问题,以及避免引入抗药性标记基因带来的安全性问题,构建了以抗铜蛋白基因CUP1为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体.以载体pYES2-PMF-rDNA为基础,以新的筛选标记基因CUP1替换原有的尿嘧啶Ura-基因,得到载体pYES2M.再顺序插入葡聚糖内切酶基因eg3、葡萄糖淀糖酶基因gal和β-葡萄糖苷酶基因bgl1,构建得到以CUP1为筛选标记的酵母整合型三价表达载体pYES2M-eg3-ga1 -bgl1,其中每个基因都具有独立而完整的表达盒,包括启动子、信号肽和终止子,从而实现多基因单表达载体一次转化.
為瞭賦予工業釀酒酵母對澱粉和纖維素的降解活性,提高釀酒酵母對粗木藷粉進行酒精髮酵時的酒精產率；另一方麵,為瞭解決工業釀酒酵母不適于使用營養缺陷型篩選標記對轉化子進行篩選的問題,以及避免引入抗藥性標記基因帶來的安全性問題,構建瞭以抗銅蛋白基因CUP1為篩選標記的釀酒酵母整閤型多基因錶達載體.以載體pYES2-PMF-rDNA為基礎,以新的篩選標記基因CUP1替換原有的尿嘧啶Ura-基因,得到載體pYES2M.再順序插入葡聚糖內切酶基因eg3、葡萄糖澱糖酶基因gal和β-葡萄糖苷酶基因bgl1,構建得到以CUP1為篩選標記的酵母整閤型三價錶達載體pYES2M-eg3-ga1 -bgl1,其中每箇基因都具有獨立而完整的錶達盒,包括啟動子、信號肽和終止子,從而實現多基因單錶達載體一次轉化.
위료부여공업양주효모대정분화섬유소적강해활성,제고양주효모대조목서분진행주정발효시적주정산솔；령일방면,위료해결공업양주효모불괄우사용영양결함형사선표기대전화자진행사선적문제,이급피면인입항약성표기기인대래적안전성문제,구건료이항동단백기인CUP1위사선표기적양주효모정합형다기인표체재체.이재체pYES2-PMF-rDNA위기출,이신적사선표기기인CUP1체환원유적뇨밀정Ura-기인,득도재체pYES2M.재순서삽입포취당내절매기인eg3、포도당정당매기인gal화β-포도당감매기인bgl1,구건득도이CUP1위사선표기적효모정합형삼개표체재체pYES2M-eg3-ga1 -bgl1,기중매개기인도구유독립이완정적표체합,포괄계동자、신호태화종지자,종이실현다기인단표체재체일차전화.
