解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2012年
4期
468-472
,共5页
杨慈清%毛会丽%郭志坤%林俊堂
楊慈清%毛會麗%郭誌坤%林俊堂
양자청%모회려%곽지곤%림준당
胚胎%绿色荧光蛋白%α-平滑肌肌动蛋白%神经丝蛋白%活体电转%鸡
胚胎%綠色熒光蛋白%α-平滑肌肌動蛋白%神經絲蛋白%活體電轉%鷄
배태%록색형광단백%α-평활기기동단백%신경사단백%활체전전%계
目的 在成功建立鸡胚活体原位电转基因技术的基础上,探讨报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达及其在鸡胚发育过程对胚胎形态结构影响,分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和神经丝蛋白(NF)的表达情况.方法 活体原位电转基因技术将pCAGGS-GFP质粒转入带壳培养第3天和第3天去壳培养至第5天的鸡胚,在电转基因24h后荧光体视显微镜观察,选择对照组和阳性表达胚胎,每组各5个胚胎,冷冻切片后进行荧光免疫组织化学检测α-SMA和NF分别在脊髓和视顶部位的表达状况.结果 在脊髓和视顶不同发育阶段和转染的不同时间,实验组、对照组及GFP阳性表达区域和正常区域内α-SMA、NF两种蛋白表达不存在差异,胚胎形态结构也不存在差异.结论 原位电转GFP在鸡胚发育早期过程中不影响正常基因的表达及鸡胚胎发育形态结构的变化,可以作为报告基因.
目的 在成功建立鷄胚活體原位電轉基因技術的基礎上,探討報告基因綠色熒光蛋白(GFP)的錶達及其在鷄胚髮育過程對胚胎形態結構影響,分析α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和神經絲蛋白(NF)的錶達情況.方法 活體原位電轉基因技術將pCAGGS-GFP質粒轉入帶殼培養第3天和第3天去殼培養至第5天的鷄胚,在電轉基因24h後熒光體視顯微鏡觀察,選擇對照組和暘性錶達胚胎,每組各5箇胚胎,冷凍切片後進行熒光免疫組織化學檢測α-SMA和NF分彆在脊髓和視頂部位的錶達狀況.結果 在脊髓和視頂不同髮育階段和轉染的不同時間,實驗組、對照組及GFP暘性錶達區域和正常區域內α-SMA、NF兩種蛋白錶達不存在差異,胚胎形態結構也不存在差異.結論 原位電轉GFP在鷄胚髮育早期過程中不影響正常基因的錶達及鷄胚胎髮育形態結構的變化,可以作為報告基因.
목적 재성공건립계배활체원위전전기인기술적기출상,탐토보고기인록색형광단백(GFP)적표체급기재계배발육과정대배태형태결구영향,분석α-평활기기동단백(α-SMA)화신경사단백(NF)적표체정황.방법 활체원위전전기인기술장pCAGGS-GFP질립전입대각배양제3천화제3천거각배양지제5천적계배,재전전기인24h후형광체시현미경관찰,선택대조조화양성표체배태,매조각5개배태,냉동절편후진행형광면역조직화학검측α-SMA화NF분별재척수화시정부위적표체상황.결과 재척수화시정불동발육계단화전염적불동시간,실험조、대조조급GFP양성표체구역화정상구역내α-SMA、NF량충단백표체불존재차이,배태형태결구야불존재차이.결론 원위전전GFP재계배발육조기과정중불영향정상기인적표체급계배태발육형태결구적변화,가이작위보고기인.
