腺病毒介导MOMP基因转染对树突状细胞免疫功能的影响
선병독개도MOMP기인전염대수돌상세포면역공능적영향
Functional effects of dendritic cells transfected with recombinant adenovirus carrying Chlamydia trachomatis serovar E MOMP gene
  • 万方数据
    中华微生物学和免疫学杂志 중화미생물학화면역학잡지
    CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
    2008年 1期 55-60 ,共6页

    吕慧%王红%李湘新%齐眉%刘娟%郑燕%李靖%赵蕾%杨熙%于修平%赵蔚明

    려혜%왕홍%리상신%제미%류연%정연%리정%조뢰%양희%우수평%조위명

    沙眼衣原体%主要外膜蛋白基因%腺病毒载体%树突状细胞 沙眼衣原體%主要外膜蛋白基因%腺病毒載體%樹突狀細胞
    사안의원체%주요외막단백기인%선병독재체%수돌상세포
    目的 探讨腺病毒(Ad)介导E型沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)基因转染对树突状细胞(DC)的表型及体内免疫功能的影响.方法 用小鼠重组粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及白细胞介素4(IL-4)从小鼠骨髓干细胞中诱导培养DC,并用大肠杆菌脂多糖(LPS)促进DC的成熟,流式细胞仪检测DC表型.用不同感染滴度(MOI)的含增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组Ad转染DC,荧光显微镜下观察EGFP的表达细胞百分率,选择最佳MOI;用最佳MOI的含MOMP基因的重组腺病毒(Ad-MOMP)转染DC,流式细胞术检测转染前后DC表型变化,并用活细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测转染前后DC刺激同种淋巴细胞增殖的能力;ELISA检测转染前后DC分泌细胞因子及DC、T细胞共同培养上清中细胞因子的水平.Ad-MOMP转染DC经尾静脉免疫小鼠,ELISA检测其脾脏淋巴细胞分泌的细胞因子.结果 诱导的DC形态典型,表面高表达CD11c、MHCⅡ类分子,中度表达CD80分子.MOI=1000为重组Ad转染DC最佳滴度,此时90%以上的DC表达荧光,Ad-MOMP转染DC后能检测到MOMP的表达.Ad-MOMP转染对DC表面的特征性表型CD11c无影响,而CD80及MHCⅡ表达上调;转染后的DC分泌大量IL-12,具有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,并刺激T细胞分泌大量IFN-γ.Ad-MOMP转染DC后尾静脉免疫小鼠,其脾细胞产生高水平的IFN-γ.结论 Ad载体能介导外源MOMP基因在DC中的表达,Ad-MOMP转染DC后MOMP基因的表达能增强DC抗原提呈功能,促进DC活化,转染后的DC与T细胞共孵育能诱导T细胞向TH1细胞分化,体内实验表明Ad-MOMP转染DC能诱导衣原体特异性TH1反应.这为Ad-MOMP转染的DC疫苗用于免疫治疗提供了理论依据和技术基础.
    목적 탐토선병독(Ad)개도E형사안의원체(Ct)주요외막단백(MOMP)기인전염대수돌상세포(DC)적표형급체내면역공능적영향.방법 용소서중조립세포일거서세포집락자격인자(GM-CSF)급백세포개소4(IL-4)종소서골수간세포중유도배양DC,병용대장간균지다당(LPS)촉진DC적성숙,류식세포의검측DC표형.용불동감염적도(MOI)적함증강록색형광단백(EGFP)기인적중조Ad전염DC,형광현미경하관찰EGFP적표체세포백분솔,선택최가MOI;용최가MOI적함MOMP기인적중조선병독(Ad-MOMP)전염DC,류식세포술검측전염전후DC표형변화,병용활세포계수시제합8(CCK-8)검측전염전후DC자격동충림파세포증식적능력;ELISA검측전염전후DC분비세포인자급DC、T세포공동배양상청중세포인자적수평.Ad-MOMP전염DC경미정맥면역소서,ELISA검측기비장림파세포분비적세포인자.결과 유도적DC형태전형,표면고표체CD11c、MHCⅡ류분자,중도표체CD80분자.MOI=1000위중조Ad전염DC최가적도,차시90%이상적DC표체형광,Ad-MOMP전염DC후능검측도MOMP적표체.Ad-MOMP전염대DC표면적특정성표형CD11c무영향,이CD80급MHCⅡ표체상조;전염후적DC분비대량IL-12,구유교강적자격동충이체림파세포증식적능력,병자격T세포분비대량IFN-γ.Ad-MOMP전염DC후미정맥면역소서,기비세포산생고수평적IFN-γ.결론 Ad재체능개도외원MOMP기인재DC중적표체,Ad-MOMP전염DC후MOMP기인적표체능증강DC항원제정공능,촉진DC활화,전염후적DC여T세포공부육능유도T세포향TH1세포분화,체내실험표명Ad-MOMP전염DC능유도의원체특이성TH1반응.저위Ad-MOMP전염적DC역묘용우면역치료제공료이론의거화기술기출.
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