胃肠病学
胃腸病學
위장병학
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY
2003年
6期
344-348
,共5页
孙蕴伟%朱颖%顾柏炜%袁耀宗%徐家裕
孫蘊偉%硃穎%顧柏煒%袁耀宗%徐傢裕
손온위%주영%고백위%원요종%서가유
胰腺星状细胞%转化生长因子β%蛋白聚糖类
胰腺星狀細胞%轉化生長因子β%蛋白聚糖類
이선성상세포%전화생장인자β%단백취당류
背景:胰腺星状细胞(PSCs)在胰腺纤维化的进程中具有重要作用,因此有必要对影响该细胞活化的细胞因子进行研究.目的:建立一种从大鼠中分离、培养PSCs的成熟方法,研究原代培养2～3代的传代PSCs中转化生长因子(TGF)-β1及其拮抗剂核心蛋白聚糖的mRNA(转录水平)和蛋白(翻译水平)的表达和分布.方法:取大鼠胰腺组织进行酶消化和不连续密度梯度离心以获得原代PSCs.采用免疫细胞化学染色检测PSCs中α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、结蛋白(desmin)和纤维连接蛋白(FN)的表达;采用免疫细胞化学染色和原位杂交方法检测传代PSCs中TGF-β1和核心蛋白聚糖的蛋白和mRNA的表达.结果:体外成功分离并培养PSCs后,免疫细胞化学染色结果显示该细胞可活化,细胞质中出现α-SMA、desmin和FN阳性表达.在传代PSCs中,TGF-β1mRNA在细胞核和细胞质内均有表达,其蛋白则主要在细胞质内表达;核心蛋白聚糖则无论mRNA或蛋白均主要在细胞核内表达.结论:大鼠PSCs可成功地在体外分离并培养.在培养过程中,该细胞可自发活化并向成纤维样细胞分化.PSCs可自分泌TGF-β1和核心蛋白聚糖,并可能在基因转录水平进行自身调控,从而对胰腺纤维化的形成产生一定影响.
揹景:胰腺星狀細胞(PSCs)在胰腺纖維化的進程中具有重要作用,因此有必要對影響該細胞活化的細胞因子進行研究.目的:建立一種從大鼠中分離、培養PSCs的成熟方法,研究原代培養2～3代的傳代PSCs中轉化生長因子(TGF)-β1及其拮抗劑覈心蛋白聚糖的mRNA(轉錄水平)和蛋白(翻譯水平)的錶達和分佈.方法:取大鼠胰腺組織進行酶消化和不連續密度梯度離心以穫得原代PSCs.採用免疫細胞化學染色檢測PSCs中α-平滑肌肌動蛋白(SMA)、結蛋白(desmin)和纖維連接蛋白(FN)的錶達;採用免疫細胞化學染色和原位雜交方法檢測傳代PSCs中TGF-β1和覈心蛋白聚糖的蛋白和mRNA的錶達.結果:體外成功分離併培養PSCs後,免疫細胞化學染色結果顯示該細胞可活化,細胞質中齣現α-SMA、desmin和FN暘性錶達.在傳代PSCs中,TGF-β1mRNA在細胞覈和細胞質內均有錶達,其蛋白則主要在細胞質內錶達;覈心蛋白聚糖則無論mRNA或蛋白均主要在細胞覈內錶達.結論:大鼠PSCs可成功地在體外分離併培養.在培養過程中,該細胞可自髮活化併嚮成纖維樣細胞分化.PSCs可自分泌TGF-β1和覈心蛋白聚糖,併可能在基因轉錄水平進行自身調控,從而對胰腺纖維化的形成產生一定影響.
배경:이선성상세포(PSCs)재이선섬유화적진정중구유중요작용,인차유필요대영향해세포활화적세포인자진행연구.목적:건립일충종대서중분리、배양PSCs적성숙방법,연구원대배양2～3대적전대PSCs중전화생장인자(TGF)-β1급기길항제핵심단백취당적mRNA(전록수평)화단백(번역수평)적표체화분포.방법:취대서이선조직진행매소화화불련속밀도제도리심이획득원대PSCs.채용면역세포화학염색검측PSCs중α-평활기기동단백(SMA)、결단백(desmin)화섬유련접단백(FN)적표체;채용면역세포화학염색화원위잡교방법검측전대PSCs중TGF-β1화핵심단백취당적단백화mRNA적표체.결과:체외성공분리병배양PSCs후,면역세포화학염색결과현시해세포가활화,세포질중출현α-SMA、desmin화FN양성표체.재전대PSCs중,TGF-β1mRNA재세포핵화세포질내균유표체,기단백칙주요재세포질내표체;핵심단백취당칙무론mRNA혹단백균주요재세포핵내표체.결론:대서PSCs가성공지재체외분리병배양.재배양과정중,해세포가자발활화병향성섬유양세포분화.PSCs가자분비TGF-β1화핵심단백취당,병가능재기인전록수평진행자신조공,종이대이선섬유화적형성산생일정영향.
