第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2007年
21期
2023-2026
,共4页
李宜成%何勇虹%彭志红%汪荣泉
李宜成%何勇虹%彭誌紅%汪榮泉
리의성%하용홍%팽지홍%왕영천
黏蛋白3%蛋白酶切%SEA组件%糖基化
黏蛋白3%蛋白酶切%SEA組件%糖基化
점단백3%단백매절%SEA조건%당기화
目的 Muc3的羧基端在翻译后经历了蛋白酶切反应,探讨Muc3的羧基端蛋白酶切反应发生是否与其羧基端内的N型糖链有关.方法 截断了的Muc3的羧基端(含完整的SEA组件)(p20SEA)采用定点突变方法在所要求的位点插入终止密码子,所表达蛋白质的检测采用pulse/chase和免疫共沉淀方法或SDS/PAGE和Western印迹方法,所表达蛋白质的N型糖链合成抑制采用Tunicamycin处理转染的COS-1细胞.结果 p20表达产物(完整的Muc3羧基端产物)经历了翻译后蛋白酶切,产生30×103的氨基端酶切片段和49×103的羧基端酶切片段;Tunicamycin处理后主要的表达蛋白是60×103的全长的非糖基化产物,22×103的少量氨基端酶切片段和41×103的羧基端酶切片段;p20SEA表达产物(含完整的SEA组件但不含SEA组件后续氨基酸的截断Muc3羧基端)抑制N型糖链出现未酶切的36×103全长产物和22×103酶切的非N糖基化产物.结论 大鼠Muc3羧基端在抑制其N型糖链合成后出现Muc3的羧基端蛋白酶切的抑制.
目的 Muc3的羧基耑在翻譯後經歷瞭蛋白酶切反應,探討Muc3的羧基耑蛋白酶切反應髮生是否與其羧基耑內的N型糖鏈有關.方法 截斷瞭的Muc3的羧基耑(含完整的SEA組件)(p20SEA)採用定點突變方法在所要求的位點插入終止密碼子,所錶達蛋白質的檢測採用pulse/chase和免疫共沉澱方法或SDS/PAGE和Western印跡方法,所錶達蛋白質的N型糖鏈閤成抑製採用Tunicamycin處理轉染的COS-1細胞.結果 p20錶達產物(完整的Muc3羧基耑產物)經歷瞭翻譯後蛋白酶切,產生30×103的氨基耑酶切片段和49×103的羧基耑酶切片段;Tunicamycin處理後主要的錶達蛋白是60×103的全長的非糖基化產物,22×103的少量氨基耑酶切片段和41×103的羧基耑酶切片段;p20SEA錶達產物(含完整的SEA組件但不含SEA組件後續氨基痠的截斷Muc3羧基耑)抑製N型糖鏈齣現未酶切的36×103全長產物和22×103酶切的非N糖基化產物.結論 大鼠Muc3羧基耑在抑製其N型糖鏈閤成後齣現Muc3的羧基耑蛋白酶切的抑製.
목적 Muc3적최기단재번역후경력료단백매절반응,탐토Muc3적최기단단백매절반응발생시부여기최기단내적N형당련유관.방법 절단료적Muc3적최기단(함완정적SEA조건)(p20SEA)채용정점돌변방법재소요구적위점삽입종지밀마자,소표체단백질적검측채용pulse/chase화면역공침정방법혹SDS/PAGE화Western인적방법,소표체단백질적N형당련합성억제채용Tunicamycin처리전염적COS-1세포.결과 p20표체산물(완정적Muc3최기단산물)경력료번역후단백매절,산생30×103적안기단매절편단화49×103적최기단매절편단;Tunicamycin처리후주요적표체단백시60×103적전장적비당기화산물,22×103적소량안기단매절편단화41×103적최기단매절편단;p20SEA표체산물(함완정적SEA조건단불함SEA조건후속안기산적절단Muc3최기단)억제N형당련출현미매절적36×103전장산물화22×103매절적비N당기화산물.결론 대서Muc3최기단재억제기N형당련합성후출현Muc3적최기단단백매절적억제.
