青岛大学医学院学报
青島大學醫學院學報
청도대학의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE QINGDAO UNIVERSITATIS
2009年
1期
1-3
,共3页
RNA,双链%抗原,CD59%转染%逆转录病毒载体
RNA,雙鏈%抗原,CD59%轉染%逆轉錄病毒載體
RNA,쌍련%항원,CD59%전염%역전록병독재체
目的 利用siRNA表达载体法构建并筛选携带针对CD59基因pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞克隆.方法 用DNA重组技术,将3条60 bp能转录产生靶向CD59小发夹RNA(shRNA)的寡核苷酸序列定向克隆入逆转录病毒载体pSUPER retro,脂质体法转染包装细胞系Phoenix A,建立产生逆转录病毒的细胞克隆.结果 重组载体经PCR及限制性内切酶酶切鉴定初步成功后测序序列正确;重组载体转染包装细胞,可表达绿色荧光蛋白,表明包装成功.结论 特异性沉默CD59基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体以及稳定产毒的细胞系构建成功,为后续进行肿瘤细胞的研究奠定了基础,可望为肿瘤治疗开辟新途径.
目的 利用siRNA錶達載體法構建併篩選攜帶針對CD59基因pSUPER retro RNAi逆轉錄病毒載體及穩定產毒的細胞剋隆.方法 用DNA重組技術,將3條60 bp能轉錄產生靶嚮CD59小髮夾RNA(shRNA)的寡覈苷痠序列定嚮剋隆入逆轉錄病毒載體pSUPER retro,脂質體法轉染包裝細胞繫Phoenix A,建立產生逆轉錄病毒的細胞剋隆.結果 重組載體經PCR及限製性內切酶酶切鑒定初步成功後測序序列正確;重組載體轉染包裝細胞,可錶達綠色熒光蛋白,錶明包裝成功.結論 特異性沉默CD59基因的pSUPER retro RNAi逆轉錄病毒載體以及穩定產毒的細胞繫構建成功,為後續進行腫瘤細胞的研究奠定瞭基礎,可望為腫瘤治療開闢新途徑.
목적 이용siRNA표체재체법구건병사선휴대침대CD59기인pSUPER retro RNAi역전록병독재체급은정산독적세포극륭.방법 용DNA중조기술,장3조60 bp능전록산생파향CD59소발협RNA(shRNA)적과핵감산서렬정향극륭입역전록병독재체pSUPER retro,지질체법전염포장세포계Phoenix A,건립산생역전록병독적세포극륭.결과 중조재체경PCR급한제성내절매매절감정초보성공후측서서렬정학;중조재체전염포장세포,가표체록색형광단백,표명포장성공.결론 특이성침묵CD59기인적pSUPER retro RNAi역전록병독재체이급은정산독적세포계구건성공,위후속진행종류세포적연구전정료기출,가망위종류치료개벽신도경.
